饲用粪肠球菌和枯草芽孢杆菌的体外评价研究

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目前在中国的养猪业生产过程中,治疗猪的肠道疾病主要依赖抗菌药物,但是抗菌药物的缺点较为明显,如耐药菌株的产生,环境污染,药物残留等,直接危害人类的健康。随着欧盟饲用抗菌药物的禁用、人们健康意识和环保意识的增强,在中国抗菌药物的添加迟早会受到一定的限制,因此开发无污染、无残留、不产生耐药性的绿色饲料添加剂是将来发展的方向。本试验选用了粪肠球菌和枯草芽孢杆菌作为试验菌株,测定了它们的世代时间,它们对常用抗菌药物的敏感性,以及对致病性大肠杆菌054、霍乱沙门氏菌A72及正常菌嗜酸乳酸杆菌CICC6075生长的影响。试验采用LB培养基,于37℃、150r/min条件下培养6h,结果表明粪肠球菌和枯草芽孢杆菌的世代时间(Generation time)分别为23.9和29.4min。这表明它们具有较快的繁殖速度。根据CLSI推荐的标准操作方法之一的常量稀释法(Microdilution)研究了粪肠球菌和枯草芽孢杆菌分别对林可霉素(LCM)、恩诺沙星(ENR)、磺胺嘧啶(SD)、硫酸链霉素(SM)、氨苄青霉素纳(AMP)、延胡索酸泰妙菌素(TML)、泰乐菌素(TYL)、氟苯尼考(FLO)、硫酸多粘菌素B(PLM)、盐酸头孢噻呋(CTX)和多西环素(DC)的最低抑菌浓度(MIC),试验结果表明,粪肠球菌对上述各种抗菌药物的MIC值分别为64、0.5、>256、64、4、256、4、4、>256、256、<0.625,参考相应的判定标准,粪肠球菌对SD、TML、CTX、LCM、SM、PLM较为耐药,临床上可以和它们配伍应用,粪肠球菌对ENR、FLO、DC、AMP较为敏感,不应该配伍应用;枯草芽孢杆菌对上述各种抗菌药物的MIC值分别为16、0.125、>256、8、16、256、2、2、256、32、0.5,按照相应的判定标准,枯草芽孢杆菌对SD、LCM、TML、PLM和CTX较为耐药,临床上可以和这些抗菌药物配伍应用,枯草芽孢杆菌对ENR、TYL、FLO和DC较为敏感,临床上不宜和它们配伍应用。试验通过混合培养的方式研究了粪肠球菌和枯草芽孢杆菌对致病性大肠杆菌、霍乱沙门氏菌及肠道正常菌嗜酸乳酸杆菌生长的影响,试验结果表明,粪肠球菌和枯草芽孢杆菌均可较好的抑制大肠杆菌和沙门氏菌的生长;粪肠球菌对嗜酸乳酸杆菌可以起到较好的促生长作用;枯草芽孢杆菌与嗜酸乳酸杆菌混合培养的前35h,对嗜酸乳酸杆菌有一定的抑制作用,但35h以后则对其有较好的促生长作用。
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