番泻叶抑菌成分的提取分离与抑菌作用研究

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番泻叶是一味常用的中草药,分布广泛,具有抗菌、泻下、止血等作用。本文以番泻叶为研究对象,用番茄晚疫病菌为供试菌种跟踪检测其抑菌性能,并对番泻叶主要抑菌物质的提取、分离纯化进行了研究,得到以下结果:1、采用回流提取法提取番泻叶中具有抑菌特性的有效成分,并确定了最佳提取条件:提取溶剂为50%的乙醇、提取温度40℃、料液比1:14、提取时间3.5h、提取次数2次。在此条件下得到的番泻叶提取物对番茄晚疫病菌的抑菌圈直径为22.5mm。2、以番茄晚疫病菌为供试菌,采用抑菌圈法检测抑菌活性,对番泻叶提取物稳定性进行研究,结果表明:番泻叶提取物对温度和紫外线的稳定性较强;添加金属离子和pH值<7时对提取物的抑菌活性有一定的促进作用。对提取物最小抑菌浓度的研究结果表明:番泻叶提取物的最小抑菌浓度为12.5mg/mL,此时的抑菌效果相当于番茄红外观1400倍稀释液,西红柿早疫晚疫灵1600倍稀释液,多菌灵1200倍稀释液。3、采用试管预试法对番泻叶的化学成分进行了系统预试。初步确定其含有黄酮及其甙、葸醌及其甙、糖及其甙类、鞣质、有机酸、挥发油等化学成分,可能含有皂甙、甾体萜类成分、强心甙、酚类等化学成分,不含生物碱。4、用四种不同极性的溶剂对番泻叶乙醇提取物进行萃取,得到五个萃取部分:石油醚部、氯仿部、乙酸乙酯部、正丁醇部及残渣部。分别对番茄晚疫病菌进行抑菌活性实验,结果表明乙酸乙酯萃取物相对于其它各萃取部的抑菌活性较强。5、用薄层层析和硅胶柱层析对番泻叶乙酸乙酯萃取部进行进一步的分离纯化,并用超导核磁波谱仪分析,得到番泻叶抗菌的有效成分之一是大黄素。6、采用外渗电导法测定番茄晚疫病菌的细胞膜通透性,结果表明:番泻叶中的活性成分可以破坏菌体细胞膜的通透性,使其电解质大量外渗,最后可能因电解质大量外渗使细胞死亡。
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