VCM-PMMA防治兔人工股骨头置换术后感染的实验研究

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目的:1、设计并制作兔人工股骨头假体; 观察VCM的耐热性能;研究VCM-PMMA在体外对细菌的抑制作用、抗生素的释放特点和生物力学特性;2、制作兔人工股骨头置换术后感染模型,探讨VCM-PMMA在感染预防中的作用;3、对感染兔人工股骨头进行一期翻修,探讨VCM-PMMA在感染兔人工股骨头一期翻修中的作用。方法:1、兔人工股骨头的制作与VCM-PMMA的离体实验:(1)测定10只兔左股骨头直径、股骨颈长度、颈干角和股骨髓腔宽度,设计和制作兔人工股骨头假体;(2)VCM在室温下和120℃烤箱中加热20min后,溶于PBS中,以荧光偏振免疫分析仪检测其中VCM的有效含量;(3)VCM-PMMA(VCM按1∶20的质量比掺入PMMA粉剂)和普通PMMA分别制成圆片状,在含表皮葡萄球菌SAL65164的琼脂药敏平皿中培养24h,观察抑菌圈的大小;(4)VCM-PMMA片于pH值6.8的PBS中浸泡洗提,分别得到第1d、2d、4d、8d、12d、16d、24d、32d 8个时相点的洗提液,测定各时相点洗提液的浓度;(5)检测普通PMMA和VCM-PMMA标准试件的压缩强度;将兔人工股骨头以VCM-PMMA和普通PMMA分别固定在兔股骨上端髓腔内,进行股骨头拔出试验;(6)扫描电镜观察VCM-PMMA表面和断面的结构。2、VCM-PMMA预防兔人工股骨头置换术后感染的实验研究:对48只日本大耳白兔行人工股骨头置换,分为四组,每组12只。对照1组应用<WP=9>普通PMMA固定假体,VCM1组应用VCM-PMMA固定假体,此二组将1×106CFU的表皮葡萄球菌SAL65164在切口缝合以后即刻注入髋关节周围。对照2组和VCM2组分别应用普通PMMA和VCM-PMMA固定假体并接种1×108CFU的表皮葡萄球菌,4w后处死动物。检测X线片、细菌培养、组织学变化以及CRP和ESR的变化。3、VCM-PMMA 在感染兔人工股骨头一期翻修中的作用:对人工股骨头置换术后感染的24只兔随机分为二组,每组12只,进行清创,一期翻修手术。对照组以单纯PMMA固定,实验组以VCM-PMMA固定,12w后处死动物。以细菌培养和罗丹明标记的兔抗表皮葡萄球菌免疫血清细菌染色观察感染治愈率,并检测X线片、组织学变化以及CRP和ESR的变化。结果:1、兔人工股骨头的制作与VCM-PMMA的离体实验:(1)根据所测股骨的各项参数,以不锈钢制作出头直径分别为7mm和8mm的兔人工骨股头;(2)室温组VCM平均有效含量与120℃组之间没有显著性差异;(3)单纯的PMMA无抑菌作用,VCM-PMMA片在表皮葡萄球菌琼脂药敏培养基上培养24h后周围有抑菌圈形成;(4)VCM-PMMA片第1d的洗提液中可获得较高初始浓度,第1~8d药物浓度下降较快,第8~16d下降渐趋平缓,第16~32d时洗提液中浓度较稳定,第32d时平均浓度仍高于表皮葡萄球菌的最小抑菌浓度;(5)VCM-PMMA和普通PMMA固定兔人工股骨头,拔出试验所需的力无统计学差异(P>0.05);VCM-PMMA和普通PMMA的压缩强度无显著性差异(P>0.05);(6)扫描电镜下见 PMMA呈多孔状,加入VCM后其形态类似,但孔隙中可见到较多的球状颗粒结构。2、VCM-PMMA预防兔人工股骨头置换术后感染的实验研究:兔人工股骨头置换4w后,X线片见发生感染的关节间隙不清晰,未发生感染的关节间隙清晰;1×106CFU的表皮葡萄球菌接种能造成对照1组75%(9/12)的兔人工股骨头置换术后感染,VCM1组25%(3/12)感染;1×108CFU的细菌造成对照2组100%(12/12)感染,VCM2组25%(3/12)感染;血清<WP=10>CRP在置换1d后就显著升高,第3d达到高峰,ESR在置换后第7d达到高峰。光镜下感染的假膜组织呈慢性炎性改变,未感染者炎性细胞较少。3、VCM-PMMA 在感染兔人工股骨头一期翻修中的作用:X线片发现对照组有6只关节脱位,实验组3只脱位;细菌检测发现对照组和实验组分别有58.3%(7/12)和16.7%(2/12)发生再感染;对照组至翻修术后8w CRP低于翻修前水平,实验组至翻修术后2w低于翻修前水平(P<0.05),ESR在对照组感染后一直居高不下,在实验组术后第4w低于翻修前水平(P<0.05)。发生再感染的假膜组织中光镜下可见大量慢性炎性细胞浸润,感染治愈者可见纤维细胞增生。结论: 1、VCM置于120℃中20min后稳定性仍较好, VCM-PMMA可持续释放VCM 达32d,并能在体外抑制细菌生长;2、VCM与PMMA粉剂按1∶20的质量比混合基本上不影响PMMA固定人工关节的力学特性;3、兔人工股骨头置换后1×108CFU的表皮葡萄球菌SAL65164即刻接种在关节周围,可成功地建立兔人工股骨头置换术后感染模型;4、VCM-PMMA固定兔人工股骨头能有效的预防感染发生,1×106CFU和1×108CFU的表皮葡萄球菌SAL65164均只能造成25%(3/12)的关节感染;5、兔人工股骨头置换后感染一期翻修时应用VCM-PMMA固定假体,能显著提高翻修的成功率。
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