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本实验以黄瓜韧皮部蛋白PP2-A1基因为研究目标,以拟南芥为主要实验对象。通过克隆得到目的基因,并采用农杆菌介导法转入野生型拟南芥,筛选培养得到成功的T2代纯合阳性转基因植株。测定分析同代野生型拟南芥及转基因型拟南芥生长指标和胁迫处理后的生理指标,对目的基因的防御功能做出相应研究验证,以期对未来的黄瓜栽培与生产提供理论支持。实验主要结果如下:(1)根据黄瓜韧皮部蛋白2基因设计特异性引物,与反转录得到的黄瓜cDNA经PCR程序结合,通过大肠杆菌转化并筛选出目的菌液,经基因测序和蛋白同源性比对分析证实目的基因克隆成功;利用农杆菌介导法转化拟南芥,成功筛选出纯合阳性转基因拟南芥植株。继续培养至T2代,以此为实验对象。(2)在基因功能验证方面,非生物胁迫以盐胁迫为例。在相同周期内,转基因型拟南芥的发芽势、发芽率和发芽指数指标均与野生型拟南芥存在差异,且总体高于野生型拟南芥。说明了转基因型拟南芥种子在盐环境中的萌发能力较强,进一步说明其抗盐能力较突出。在不同盐浓度处理下,转基因型拟南芥的POD和CAT活性高于野生型拟南芥,证明了转基因型拟南芥相关防御能力较强。(3)生物胁迫研究采用灰霉菌和疫霉菌侵染处理,结果显示:真菌侵染后,转基因型拟南芥表现出较强的抵抗能力,生长状态较野生型更好;相关生理指标显示,处理后的转基因型拟南芥POD和CAT活性均高于野生型拟南芥,说明转基因型拟南芥在防御真菌侵染过程中比野生型拟南芥的能力更强。综上所述,本实验在成功克隆得到目的基因的基础上,利用转基因拟南芥为对象开展相关防御功能研究,通过盐胁迫和真菌侵染处理,结果总体显示出转基因型拟南芥在抗逆反应中表现较为积极,证明其相关防御功能较强。