【摘 要】
：
目的:通过探究经过肿瘤治疗电场（Tumor Treating Fields,TTFields）处理的人小胶质细胞HMC-3的细胞活性变化以及表达M1型炎性细胞因子（IL-6、IL-1β、TNF-α、i NOS）和M2型抗炎细胞因子（TGF-β）的多少来明确其对小胶质细胞活性和功能的影响,以期能进一步明确、完善TTFields对肿瘤抑制作用的具体机制,为电场治疗在颅内肿瘤的应用提供更精准有效的治疗策
【基金项目】
：
山西省自然科学基金“肿瘤治疗电场对胶质母细胞瘤免疫微环境影响及机制的研究（编号:20210302124380）”； 山西省人民医院136专项基金“小胶质细胞在胶质母细胞瘤发生发展过程中的作用机理研究（编号:sj200190023）”；
论文部分内容阅读
目的:通过探究经过肿瘤治疗电场（Tumor Treating Fields,TTFields）处理的人小胶质细胞HMC-3的细胞活性变化以及表达M1型炎性细胞因子（IL-6、IL-1β、TNF-α、i NOS）和M2型抗炎细胞因子（TGF-β）的多少来明确其对小胶质细胞活性和功能的影响,以期能进一步明确、完善TTFields对肿瘤抑制作用的具体机制,为电场治疗在颅内肿瘤的应用提供更精准有效的治疗策略。方法:（1）TTFields基础实验设备构建:（1）计算参数:测量T25细胞培养瓶宽度、两侧壁的厚度以及介电常数,再利用双层介质模型中场强的计算公式E2=U/ε2（d1/ε1+d2/ε2）以及TTFields的场强大小（1-3V/cm）即可确定两侧壁所需电压的大小;（2）将锂电池连接片用双面导电的铜箔胶带紧挨着T25细胞培养瓶的底边贴在其两侧壁制作TTFields基础实验设备所需细胞培养瓶;（3）提前将一正一负两根鳄鱼夹转香蕉插连接线通过过线孔放入恒温培养箱,做好箱内消毒;（4）在实验需要的时候连接整套设备,调整好实验参数,接通电源。（2）细胞实验:（1）人小胶质细胞HMC-3进行细胞培养（37℃,5%CO2）;（2）实验分为空白对照组（NC组）、TTFields干预组（TTF组）以及脂多糖诱导组（LPS组）,其中NC组、TTF组为正式实验部分,LPS组为小胶质细胞极化方向的验证组,在完全相同的条件下给三组细胞培养瓶接种4×10~5个HMC-3细胞,并加入等量MEM完全培养基（5ml）进行培养;（3）在细胞贴壁时进行细胞换液,再次各加入5ml培养基,然后TTF组进行电场干预,LPS组加脂多糖进行诱导（浓度为0.2mg/ml）;（4）贴壁后24小时进行细胞换液,收集NC组、TTF组细胞上清液-80℃保存;（5）贴壁48小时再次收集NC组、TTF组细胞上清液-80℃保存,并对两组细胞进行活细胞计数,然后收集三组细胞沉淀在-80℃保存;（6）进行ELISA、RT-q PCR实验,并对结果进行统计学分析。结果:（1）经TTFields处理48小时的HMC-3人小胶质细胞细胞数量与细胞活力与对照组无明显差异。（2）经TTFields处理的HMC-3人小胶质细胞,促炎细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α、i NOS m RNA的表达水平均升高,以IL-6较为显著,该变化与LPS诱导组趋势相同,但无LPS诱导组升高显著。（3）经TTFields处理的HMC-3人小胶质细胞在第一个24小时和第二个24小时时细胞上清液中分泌的细胞因子只有IL-6较空白对照组升高且具有统计学意义,其余促炎细胞因子IL-1β、TNF-α与M2型抗炎细胞因子TGF-β有升高但无统计学意义。（4）经TTFields处理的HMC-3人小胶质细胞在第一个24小时和第二个24小时时相比,细胞上清液中分泌的促炎、抗炎细胞因子无明显差异。结论:（1）TTFields对HMC-3人小胶质细胞的细胞活性未见明显影响。（2）TTFields促使人小胶质细胞HMC-3所产生的M1型炎性细胞因子如IL-6、IL-1β等增加,表明其可能有与LPS相同的促使小胶质细胞向M1促炎表型激活的作用,从而发挥抗肿瘤作用。
其他文献
三级课程管理体制赋予了学校课程管理自主权,学校层级的课程管理开始得到应有的重视。学校课程管理是学校课程研究和管理研究耦合的产物,现有学校课程管理内涵的界定多以学校为特定场域,学校课程概念为逻辑起点,管理的特性辅之;学校课程管理的主要内容包括对课程生成系统、课程实施系统、课程评价系统的管理;学校课程管理模式包括行为、管理、系统、人本主义等模式。目前学校课程管理仍旧存在较多的问题,影响学校课程管理的因
目的:本研究将探索IL-22是否具有抗抑郁作用及其抗抑郁作用的机制。方法:1.构建社交挫败应激小鼠抑郁模型,研究IL-22是否具有抗抑郁作用首先将C57BL/6J小鼠随机分为两大组,对照组（Control,Con组）16只和慢性社交挫败应激模型组（chronic social defeated stress,CSDS组）16只。CSDS组的应激包括5-10 min的身体攻击和24 h的感官接触,持
目的:分析高血压患者血浆中儿茶酚胺类（catecholamines,CAs）物质以及代谢产物,多巴胺（dopamine,DA）、肾上腺素（epinephrine,E）、去甲肾上腺素（noradrenaline,NE）、甲氧基肾上腺素（metanephrine,MN）和甲氧基去甲肾上腺素（normetanephrine,NMN）,探讨它们与高血压患者的不同血压分级和危险分层的相关性。方法:选择201
目的:本论文旨在以小窝蛋白-1（Caveolin-1,CAV-1）为靶标,以课题组前期获得的二苯甲酮类溴酚2,4’,5’-三羟基-5,2’-二溴二苯甲酮（LM49）为先导化合物,将二苯甲酮骨架替换为二苯甲酰甲烷,设计合成系列二苯甲酰甲烷类卤酚化合物。LM49具有抗大鼠急性肾盂肾炎等多种药理活性,其机制与抗氧化和抗炎有关。因此将目标化合物与炎症、氧化应激相关蛋白CAV-1进行分子模拟对接,预测其生物
目的:筛选出可以将北桑寄生总黄酮中鼠李素-3-O-鼠李糖苷水解为鼠李素的细菌菌株,通过克隆、表达其α-L-鼠李糖苷酶编码基因获得目标α-L-鼠李糖苷酶,进一步对目标酶的酶学性质进行研究,为重组α-L-鼠李糖苷酶的应用奠定理论基础。方法:试验一以北桑寄生总黄酮为底物,初步筛选出可以将北桑寄生总黄酮中鼠李素-3-O-鼠李糖苷转化为鼠李素的细菌菌株,以27F和1492R扩增其16S r DNA序列,测序
目的:研究O-岩藻糖基化转移酶（Protein O-fucosyltransferase 1,POFUT1）在胶质瘤中的表达情况及发挥的生物学功能,并初步探索POFUT1对胶质瘤发挥调控作用的分子机制。方法:1.利用CGGA数据库和TCGA数据库分析POFUT1在胶质瘤组织中的表达量情况;利用卡方检验分析POFUT1的表达量和患者临床信息的相关性;利用Kaplan-Meier生存分析和COX回归分
目的:繁育Seipin+/-/APP/PS1小鼠;观察Seipin+/-/APP/PS1小鼠的体重,生存时间,学习记忆能力,认知灵活性,短期工作记忆能力和焦虑情绪的变化;进一步检测Seipin+/-/APP/PS1小鼠海马β淀粉样蛋白（βamyloid,Aβ）斑块沉积变化和血糖、葡萄糖耐量等糖代谢改变。探讨Seipin基因杂合性缺失对阿尔茨海默病（Alzheimer’disease,AD）的影响,
目的:探讨SRGN在宫颈癌组织和正常宫颈组织中的表达情况,及其与上皮细胞间质转化之间的相关性。方法:通过GEPIA2数据库挖掘分析SRGN在不同肿瘤中的差异表达情况及其在宫颈癌中的生存预后情况,其次通过GEO数据库挖掘数据集GSE9750,分析SRGN在宫颈癌组织和正常宫颈组织中的基因差异表达情况。TIMER2数据库分析SRGN与CAFs之间的相关性。收集70例宫颈癌患者手术标本石蜡切片和30例非
目的:喜树碱（CPT）对多数癌症细胞都有明显的抑制增殖的效果。然而,极难溶于水、全身毒性等不利因素导致其在临床上的使用受到了限制。另外,随着癌细胞发展而产生的治疗抗性成为目前癌症治疗的主要限制之一。目前,纳米颗粒用作药物载体具有多种明显的优势,其能够将多种药物定向递送至目标部位。此外还能提高药物的溶解度。有研究表明,抑制自噬可以使癌细胞重新对药物敏感。3-甲基腺嘌呤（3-MA）作为一种自噬抑制剂,
目的:本研究旨在通过模拟在不同样本量情况下,构建不同变量组合下的GPS模型,针对连续性暴露因素,探索GPS-OLS,GPS-Boosting以及CBGPS法对估计因果效应的影响,以及在哪种变量组合场景下GPS估计法估计暴露效应最佳。另外本研究将GPS估计法应用在营养流行病学领域,通过三种GPS估计法均衡混杂效应后,探索肉类食物摄入量与高血压之间的因果关联。方法:本研究通过蒙特卡洛模拟,分别生成大样