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雷公藤内酯醇,亦称雷公藤甲素,是从雷公藤、昆明山海棠及东北雷公藤等植物中提取分离出来的环氧二萜内酯类化合物,该成分水溶性低,口服体内生物利用度低,且胃肠道刺激性大,患者顺应性不佳。将雷公藤内酯醇制成自乳化药物传递系统,可在保持其抗癌活性的基础上,改善它水溶性差及毒性大的问题,为扩大雷公藤内酯醇的临床应用范围及抗癌药物的研发提供理论依据。主要研究内容、方法和结果如下:(1)通过比较雷公藤内酯醇在不同油相、表面活性剂和助表面活性剂中的溶解度,对自乳化释药系统的油相和混合表面活性剂进行了筛选,初步确定以中链甘油三酯为油相,聚氧乙烯蓖麻油、吐温-20为表面活性剂,聚乙二醇-400为助表面活性剂;通过绘制伪三元相图进一步确定了以聚氧乙烯蓖麻油作为表面活性剂;以自微乳化时间、形成微乳的外观、粒径、含药量为评价指标,通过2因素、5水平的星点设计-效应面分析,对雷公藤内酯醇自乳化给药系统处方的各相质量比例进行优化,最终确定的处方工艺为:油相质量占比25.3%,表面活性剂质量占比49.6%,助表面活性剂质量占比25.1%,理论粒径为31.168nm,理论含药量为2.981mg/g。优化后的处方验证符合预测结果。(2)对优化后处方工艺所制备的TP-SMEDDS进行了外观、形态、粒径、含药量等质量评价,建立了雷公藤内酯醇自乳化含量测定的体外分析方法。实验结果表明:制备的TP-SMEDDS在透射电镜下观察其为圆球形,大小均匀,分布均匀,没有粘连;激光粒度测定仪测定其粒径在50 nm以下;体外释放实验显示其在pH 7.4 PBS介质中6 h时已基本释放完全;体外释药数据拟合显示雷公藤内酯醇自微乳溶液的释放曲线符合一级方程模型。结果显示自微乳给药系统能够提高雷公藤内酯醇的溶出度和溶出速度。(3)建立荷人胃癌细胞株MGC80-3裸鼠模型,分为模型对照组、TP-SMEDDS高、中、低三个剂量组(0.6mg/kg、0.4mg/kg、0.2mg/kg),以及TP原料药高、中、低三个剂量组(0.6mg/kg、0.4mg/kg、0.2mg/kg),通过比较各组裸鼠的体质量、移植瘤体积、重量、抑瘤率和肿瘤延迟生长时间来评价制备的TP-SMEDDS的体内抗肿瘤活性。药效实验结果表明,对比模型对照组,TP表现出明显的抗肿瘤作用;对比TP原料药组,TP-SMEDDS能显著抑制移植瘤的生长;给药结束后,0.6mg/kg的TP-SMEDDS组的移植瘤体积(117.5±76.54mm3)显著低于模型对照组的(438.1±192.4mm3),其肿瘤抑制率达到47.06%,高于同等剂量下的TP原料药组(41.18%)。结果显示自微乳给药系统能够提高雷公藤内酯醇的体内抗肿瘤作用。(4)检测各裸鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、尿素、肌酐、总蛋白、白蛋白、球蛋白及血尿酸;计算肝、肾指数;取各组裸鼠肝、肾组织病理切片观察各组织形态学变化。结果表明,雷公藤内酯醇自微乳组与雷公藤内酯醇原药组相比,给药后裸鼠血清AST和ALT极显著下降(P<0.01);总蛋白显著升高(P<0.05),白、球蛋白比值极显著升高(P<0.01);血肌酐有下降趋势,但无统计学意义;尿素显著下降(P<0.05);尿酸极显著下降(P<0.01)。雷公藤内酯醇自微乳组肝细胞轻微肿胀,少见炎细胞灶状浸润;雷公藤内酯醇原药组肝组织出现脂肪变形,肝细胞细胞核增大,碎片状坏死,中重度纤维化。两组动物的肾脏组织均无明显病理特征。雷公藤内酯醇自微乳对裸鼠肝肾功能影响明显小于雷公藤内酯醇原药,自微乳剂型可明显降低雷公藤内酯醇的肝肾毒性。结论:雷公藤内酯醇自乳化系统在体外水化后微乳粒径小,分布均匀,含药量高,且制备方法简单。裸鼠体内药效实验表明,自乳化系统可以有效改善雷公藤内酯醇原药的口服生物利用度,同时可以降低原药的肝肾毒性。综上所述,该剂型可以成为雷公藤内酯醇扩大临床应用范围的新途径、新选择。