[实验目的]:分离神经胶质瘤源性exosome,对差速离心法和密度梯度离心法进行比较。[方法]:术中取人脑神经胶质瘤病理标本,行原代细胞培养,待细胞附壁生长良好后,以无血清培养基培养22.5小时后采集上清液,等分为两份,两组分别以差速离心法和密度梯度离心法提取exosome。然后于透射电镜下观察、照相,确认exosome的存在,并对两组的形态结构进行对比。再行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析两组的蛋白组成,对比他们有无异同。[结果]:1、差速离心组和密度梯度离心组,均可于电镜下确认神经胶质瘤细胞能够分泌exosome。密度梯度离心法提取的胶质瘤源性exosome在电镜下呈典型的囊泡状结构,中央为低电子密度区,有完整包膜,圆形或椭圆形,直径介于55-155nm之间,平均直径在105nm左右。差速离心法提取的胶质瘤源性exosome具有与密度梯度离心组相同的囊泡状结构,两组直径抽样比较无显著差异性。2、经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,可见两种方法提取的exosome的蛋白质条带组成一致。[结论]:胶质瘤细胞可以分泌exosome。差速离心法可以达到与密度梯度离心法相同的分离和提纯效果。而前者则具有相对较低的技术门槛和科研成本,有利于exosome的研究和应用。