【摘 要】
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热应激主要是指环境温度超过机体自身调节能力时而引发的一系列免疫应答反应。当热应激程度超出机体最大承受范围时,会影响生长发育、造成组织损伤、免疫功能损伤等一系列危害。通过食品营养干预机增强免疫功能、维护机体健康,是食品营养科学的重要发展方向。植物活性成分在缓解热应激上具有多途径、多靶点的优点,潜力巨大。L-茶氨酸是茶叶中的一种非蛋白质氨基酸,具有调节免疫、抗氧化、抗热应激等多种生物活性,但鲜见用于预
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热应激主要是指环境温度超过机体自身调节能力时而引发的一系列免疫应答反应。当热应激程度超出机体最大承受范围时,会影响生长发育、造成组织损伤、免疫功能损伤等一系列危害。通过食品营养干预机增强免疫功能、维护机体健康,是食品营养科学的重要发展方向。植物活性成分在缓解热应激上具有多途径、多靶点的优点,潜力巨大。L-茶氨酸是茶叶中的一种非蛋白质氨基酸,具有调节免疫、抗氧化、抗热应激等多种生物活性,但鲜见用于预防热应激对机体免疫功能损伤的相关研究。为此,本研究以7周龄SPF级BALB/c雄性小鼠作为实验对象,以三组低(100m g/kg·d-1)、中(200mg/kg·d-1)、高(400mg/kg·d-1)三种不同剂量L-茶氨酸分别灌喂正常小鼠28d、灌喂正常小鼠28d后第29-35d灌喂饮用水并进行热应激处理（前期预防干预）以及灌喂正常小鼠35d并在第29-35d进行热应激处理（长期预防干预）,采用生理生化指标检测、组织切片病理学观察、Western blotting等技术方法,从小鼠生长性能、组织形态结构、血清生化指标、肝组织抗氧化指标、与热应激及免疫相关的信号通路上的蛋白表达等方面,研究并分析了L-茶氨酸预防热应激对小鼠免疫功能的损伤及其机制,为维护热应激条件下机体健康、促进食品营养干预多元化发展以及L-茶氨酸深层次利用提供科学依据。主要研究结果及结论如下:（1）对比空白对照组,热应激造成小鼠肝脏及空肠组织损伤,降低了小鼠体质量（P＜0.01）,上调了血清炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β含量、AST、ALT酶活性（P＜0.01）及肝脏MDA含量（P＜0.01）,下调了肝脏抗氧化酶SOD、CAT、GSH-PX活性（P＜0.01）。对比热应激处理组,各剂量L-茶氨酸前期预防组、L-茶氨酸长期预防组均可减轻肝脏及空肠组织损伤,促进热应激下小鼠体质量增加（P＜0.01）,下调血清炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β含量（P＜0.01）、肝脏MDA含量（P＜0.01）,上调肝脏抗氧化酶SOD、CAT、GSH-PX活性（P＜0.01）,其中中剂量L-茶氨酸前期预防组与各剂量L-茶氨酸长期预防组下调血清AST、ALT酶活性（P＜0.01）。以L-茶氨酸长期预防中剂量组效果较佳。（2）根据上述结果,选取空白对照组、热应激处理组以及L-茶氨酸各中剂量组进行Western blotting分析。对比空白对照组,热应激显著上调ASK1、MK2、HSP27蛋白表达及p-P65/P65水平（P＜0.05）,显著下调MEK3、MEK6、MSK1蛋白表达及p-P38/P38水平（P＜0.05）。对比热应激处理组,L-茶氨酸前期预防组、L-茶氨酸长期预防组均显著下调MK2、HSP27蛋白表达（P＜0.05）,上调MEK3、MSK1蛋白表达及p-P38/P38水平（P＜0.05）。其中L-茶氨酸长期预防组还显著下调了ASK1蛋白表达、p-P65/P65水平（P＜0.05）,上调了MEK6蛋白表达（P＜0.05）。以L-茶氨酸长期预防中剂量组效果较佳。综上,L-茶氨酸预防干预能够促进热应激条件下小鼠的生长性能,减轻热应激造成的肝脏及空肠的损伤,抑制热应激造成的炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β含量,AST、ALT酶活性与MDA含量上调,抑制热应激造成的抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px失活。其作用机制为:通过介导P38信号通路,抑制MK2的过表达以及下调MK2下游HSP27蛋白的过表达所导致的p-P65/P65的上升,从而抑制热应激所带来的炎症反应以减轻机体免疫功能所受损伤。
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