自噬在小鼠卵母细胞老化中作用的初步研究

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卵母细胞老化过程中氧自由基累积导致线粒体、内质网等细胞器功能受损,细胞内Ca2+平衡失调,MPF活性下降,卵母细胞的激活敏感性升高,胚胎发育能力下降。自噬是吞噬自身细胞质蛋白或细胞器并使其包被进入囊泡,与溶酶体融合形成自噬溶酶体,降解其所包裹的内容物的过程,藉此实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。研究发现自噬是胚胎发育所必需的,并且在卵母细胞体外成熟期间激活自噬能够提高胚胎发育能力,但卵母细胞老化过程中自噬的变化及作用研究较少。因此我们以小鼠为模型,研究体内成熟卵母细胞在体内和体外老化过程中自噬的变化规律,以及自噬对卵母细胞老化和发育的影响。结果如下:1、小鼠卵母细胞体内老化12h后自噬降低,老化24h后自噬不再下降。2、小鼠卵母细胞体外老化12h期间在H202条件培养基中培养,与对照组相比自噬下降;添加MG132组自噬则高于对照组。3、小鼠卵母细胞体外老化12h期间,添加自噬激活剂Rapamycin,自噬增加,激活率下降,胚胎发育能力升高;而添加自噬抑制剂3-MA,自噬下降,激活率增加,胚胎发育能力降低。4、小鼠卵母细胞体外老化12h后自噬降低,老化24h后自噬不再下降。5、小鼠卵母细胞体外老化0h时或老化24h时添加3-MA,降低卵母细胞碎裂率;而在卵母细胞老化12h或24h期间添加3-MA,不影响卵母细胞碎裂。6、小鼠卵母细胞体外老化期间,添加Rapamycin,不影响卵母细胞碎裂。总之,卵母细胞无论在体内还是在体外老化过程中自噬下降,老化24h后自噬不再下降。卵母细胞体外老化12h期间,激活自噬,降低激活率,提高发育能力;抑制自噬,增加激活率,降低发育能力。自噬不影响卵母细胞碎裂。
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