论文部分内容阅读
作为南瓜籽加工的副产物——南瓜籽粕,’其蛋白含量丰富,氨基酸比例与人体所需氨基酸组成模式相似,作为一种良好的蛋白质资源,对其进行研究与开发,具有较大的应用价值和前景。本研究以南瓜籽粕为原料,进行了蛋白提取及其酶解物的制备和抗氧化性研究。分别选用碱溶法和碱溶——超声辅助法提取南瓜籽粕蛋白,以蛋白得率为指标,确定最佳提取工艺。碱溶法工艺为：料液比1：25、碱溶pH值12、酸沉pH值4.5,60℃恒温振荡水浴,蛋白得率为51.04%；超声辅助法工艺为：料液比1：25、碱溶pH值12、酸沉pH值4.5、超声功率400W,时间20min,蛋白得率为67.75%。以所提取蛋白为原料,水解度、可溶性多肽得率及DPPH-清除率为指标,进行蛋白酶筛选实验；以所选酶进行酶解反应,确定最佳酶解工艺。本实验水解用酶为：碱性蛋白酶和风味蛋白酶。碱性蛋白酶酶解工艺为：温度55℃、加酶量6000U/g、pH值8.0、底物浓度4%,时间6h；风味蛋白酶酶解工艺为：加酶量800U/g、pH值7.0、时间1.5h、温度50℃；最终酶解产物的DPPH-清除率为76.65%。超滤分级处理酶解物,分别测定酶解物体外抗氧化活性,筛选目标酶解物。结果表明,分子量小于3kDa的酶解物,其DPPH-清除率84.29%、OH.清除率69.98%、Ｏ2·清除率53.80%,表现出最优体外抗氧化活性。以小鼠肝脏中超氧化歧化酶(SOD)活力、过氧化氢酶(CAT)活力和丙二醛(MDA)的含量为指标,测定酶解物体内抗氧化活性。动物实验表明,与标准对照组相比,高、中、低剂量组均表现出较高的体内抗氧化活性(P<0.01)。由此可见,所制备酶解物具有较优的抗氧化活性。选择Sephadex G-15葡聚糖凝胶对目标酶解物进行分离实验。.结果表明,可分离出三种有效组分,其分子量分别为2738Da、521Da、181Da。