口蹄疫(Foot-and-Mouth Disease, FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus, FMDV)引起的烈性传染病,主要感染牛、羊、猪等家畜。在当前FMD流行的国家和地区,灭活疫苗在疫情防控中仍发挥着重要作用。FMD灭活疫苗的生产必须在生物安全三级以上的车间进行,疫苗生产车间必须有高度安全的防泄漏系统,以防止病毒泄漏、扩散引起疫病暴发。尽管如此,因生产用强毒的泄露而导致的FMD暴发时有发生,造成了巨大的经济损失。因此,在没有安全、有效的FMD新型疫苗的情况下,在灭活疫苗生产中减少或停止使用强毒,寻求使用中等毒力或者弱毒力种毒替换强毒进行生产,才能从根本上解决潜在的散毒危机。本研究在实验室已构建的缺失毒力蛋白Lpro、删除结构蛋白VP1、VP2和VP3并插入多克隆位点SspI和SgrAI的载体上,插入O型FMD疫苗种毒猪源泛亚毒株的结构蛋白VP1、VP2和VP3编码序列,构建感染性克隆,并成功拯救出嵌合弱毒v4-LL,进而研究测定了该病毒的生物学特性。结果发现v4-LL能够在贴壁和悬浮细胞中有效增殖；具有与强毒相同的乳鼠致病力；能导致豚鼠发病,但症状轻微；使用107LD50病毒量接种猪后,猪没有出现典型的FMD症状。结果证明v4-LL具有良好的细胞培养增殖能力,对乳鼠的致病力与强毒相当,对豚鼠的致病力低,对猪无明显致病力。这为使用该嵌合弱毒作为FMD安全制苗种毒的可行性提供了基础试验数据,为使用该弱毒载体系统制备FMD安全种毒做了铺垫,探索了解决当前FMD灭活疫苗生产存在散毒风险的新方法。