目的:放射性物质泄漏引发的事故,以及在医疗、工业等领域中的辐射暴露成为了当代危害人类健康的不容忽视的风险来源。皮肤是人体最大的器官,是机体与外界的保护屏障,因此放射性皮肤损伤成为核事故及放疗、工业暴露后的常见并发症。目前对于治疗放射性皮肤损伤的策略早已不限于手术及局部用药,组织工程皮肤替代物的发展提供了广阔的思路。丝素蛋白（SF）和壳聚糖（CS）通过酰胺化反应交联、梯度冻干可形成具有优异生物相容性的三维立体多孔支架促进皮肤细胞增殖迁移,干细胞、细胞因子也结合水凝胶、纳米微球、微针注射装置等在临床试验中取得满意的效果。本研究旨在探讨丝素蛋白/壳聚糖支架结合脂肪来源干细胞对放射性皮肤损伤的修复作用及其可能的机制。方法:用酶解法提取脂肪来源的干细胞（ADSCs）,流式检测细胞表面标志物,进行成骨、成脂分化培养鉴定其分化能力,活体成像及组织切片观察ADSCs局部注射后在体内的定位及存活情况。随后用超速离心法提取ADSCs外泌体（ADSCs-EXOs）,Western blot检测外泌体的主要膜蛋白标志物,透射电镜观察其结构,粒径分析检测外泌体的大小,并使用Mem Dye-Red染色对外泌体进行标记。制备复合SF/CS支架后,扫描电镜观察ADSCs、人表皮角质形成细胞（HaCaT）、人真皮成纤维细胞（WS1）三种细胞在支架上的生长情况。以HaCaT、WS1为研究对象,放射后与SF/CS支架、ADSCs、ADSCs-EXOs、去EXOs条件培养基共培养。采用平板克隆、CCK8、EdU488细胞增殖实验对皮肤细胞的增殖能力进行检测;通过划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移能力;通过β-半乳糖苷酶活性检测细胞衰老情况;采用TUNEL凋亡检测及流式细胞仪对细胞凋亡率进行检测。随后以人血管内皮细胞EC-304和人淋巴管内皮细胞HLEC为实验对象,照射后与支架及ADSCs共培养,研究对管形成能力的影响。动物实验采用40 Gy电子线照射大鼠皮肤组织以构建大鼠放射性皮肤损伤模型,溃疡形成后分别用SF/CS支架、ADSCs处理创面,统计各处理组的伤口愈合率变化并与对照组进行比较,皮肤组织切片HE及MASSON染色评价表皮厚度、血管形成及胶原沉积情况。结果:成功提取了脂肪来源的干细胞及外泌体,通过鉴定和分析,脂肪来源的干细胞具有成骨、成脂分化的能力,在注射部位可存活2周以上。超速离心法提取的外泌体大小符合要求,并可在短期内掺入细胞中。ADSCs和皮肤主要细胞HaCaT、WS1均可以在支架上生长。体外实验结果显示,SF/CS支架结合ADSCs可促进放射后皮肤细胞HaCaT、WS1细胞的增殖及迁移,改善细胞衰老及凋亡,增强EC、LEC细胞的管形成能力。体内实验结果显示,SF/CS支架结合ADSCs不但促进了创面再上皮化、增加了血管生成、改善了胶原重塑、刺激皮肤附件新生,还可以修复愈合后创面外观,接近“无痕愈合”。结论:SF/CS支架结合ADSCs可改善电离辐射对皮肤主要细胞的损伤效应,促进皮肤细胞增殖、迁移,抑制衰老、凋亡,刺激血管形成,促进创面再上皮化,增加胶原沉积和皮肤附件新生,对放射性皮肤损伤创面的修复作用显著。