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目的:
为提升《贵州省中药材、民族药材质量标准》(2003版)收载品种南蛇藤根药材(来源为苦皮藤Celastrus angulatus Maxim.和粉背南蛇藤Celastrus hypoleucus(Oliv.)Warb.ex Loes.的根)的质量标准，分别对该两个来源药材进行质量控制方法研究，研究过程中发现，两个来源种的资源量差异极大，苦皮藤资源分布广泛且蕴藏量丰富，粉背南蛇藤分布狭窄且资源量极少。因此课题组除了进行两个药材的质量控制方法研究;也对资源丰富的苦皮藤进一步进行药效学初步研究;同时对苦皮藤和粉背南蛇藤及近缘种灰叶南蛇藤(Celastrus glaucophyllus Rehd.et Wils.)、显柱南蛇藤(Celastrus stylosus、Wall.)和短梗南蛇藤(Celastrus rosthornianus Loes.)五种药用植物进行系统的显微鉴别比较研究，为进一步开发利用苦皮藤药用资源奠定基础，为苦皮藤和粉背南蛇藤及几个近缘种的鉴别提供参考。
方法:
1.按照《中国药典》(2015版)质量标准要求的研究内容，对南蛇藤根药材的两个来源苦皮藤和粉背南蛇藤分别进行系统的性状鉴别，显微鉴别，水分、灰分检查及浸出物测定;分别用薄层色谱法和高效液相色谱法，以儿茶素和表儿茶素为指标性成分对苦皮藤进行定性鉴别和含量测定，以南蛇藤素和扁蒴藤素为指标性成分对粉背南蛇藤进行定性鉴别和含量测定。
2.采用小鼠醋酸扭体法、小鼠急性耳廓肿胀法、小鼠棉球肉芽肿法研究苦皮藤药材水提物及醇提后不同萃取部位对小鼠的镇痛、抗炎作用;利用经典急性毒性试验法研究苦皮藤醇提后不同萃取部位对小鼠的急性毒性情况。
3.分别对苦皮藤、粉背南蛇藤及近缘种灰叶南蛇藤、显柱南蛇藤和短梗南蛇藤五种药用植物进行粉末制片、叶上下表皮表面制片，对根、茎、叶、果实进行石蜡包埋横切制片，利用显微镜观察记录特征，归纳总结每种植物的显微特征并比较种间差异。
结果:
1.通过对南蛇藤根药材的两个来源苦皮藤(11批)和粉背南蛇藤(3批)的质量控制方法研究，得出以下结果:①总结归纳了苦皮藤药材的性状鉴别特征和显微鉴别特征;薄层色谱法鉴别苦皮藤药材的方法稳定、可靠:测定结果规定该药材的水分不超过14.O％、总灰分不超过6.5％、酸不溶性灰分不超过5.5％、醇溶性浸出物不少于19.0％;高效液相色谱法测定11批该药材中儿茶素和表儿茶素的含量，暂定苦皮藤药材中儿茶素和表儿茶素的含量分别不低于0.1％和0.06％。②总结归纳了粉背南蛇藤药材的性状鉴别和显微鉴别特征;薄层色谱法鉴别粉背南蛇藤药材的方法稳定、可靠;根据3批药材的检查结果，水分平均值为10.61％、总灰分平均值为4.95％、酸不溶性灰分平均值为2.50％、水溶性浸出物平均值为15.52％;高效液相色谱法测定该药材中南蛇藤素和扁蒴藤素的含量，3批药材中南蛇藤素和扁蒴藤素的百分含量平均值分别为0.093％和0.0064％;由于粉背南蛇藤样品批次较少，检查项及含量测定项的数据范围较窄，暂无法做限度规定。
2.药效学实验结果显示:苦皮藤药材的水提物不能明显减少小鼠的扭体次数、不能明显抑二甲苯致小鼠耳廓肿胀和小鼠棉球肉芽肿的增生;将药材醇提后萃取的不同极性部位中，石油醚萃取部位对小鼠灌胃给药的LD50为157/kg，乙酸乙酯、正丁醇萃取部位、剩余部位和醇提后水煎煮部位对小鼠的最大耐受量分别为258g/kg、304g/kg、298g/kg和250g/kg;在药材醇提后萃取的不同极性部位中，乙酸乙酯和正丁醇萃取部位经口给药能明显延缓小鼠出现扭体的时间，减少小鼠的扭体次数，抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀和小鼠棉球肉芽肿增生。
3.通过对苦皮藤、粉背南蛇藤及近缘种灰叶南蛇藤、显柱南蛇藤和短梗南蛇藤五种植物的显微鉴别研究，总结归纳了五个种间的显微鉴别特征如下:①苦皮藤:根的皮层较窄，中心无髓;茎横切面形成层类圆形，髓部的薄壁细胞内含草酸钙簇晶;叶上表皮中心有粉红色小点，叶下表皮气孔为直轴式;果实横切面胚乳细胞呈多角形;②粉背南蛇藤:根的皮层宽广，约占1/2;叶横切面薄壁细胞含色素块，叶下表皮气孔为直轴式;果实中果皮薄壁组织内有紫色块状物散在;③灰叶南蛇藤:根的皮层较窄，中心无髓;茎的形成层呈不规则形，木质部导管排列成环状，横切面髓部的薄壁细胞内含草酸钙簇晶:叶下表皮气孔为直轴式，果实横切面胚乳细胞呈多角形;④显柱南蛇藤:根的皮层较窄，中心有髓，横切面的木栓层外侧有气孔，髓部的薄壁细胞内含草酸钙簇品;叶下表皮气孔为平轴式:⑤短梗南蛇藤:根的皮层较窄，中心有髓，横切面的木栓层外侧有气孔;叶上表皮细胞呈较大的类波状不规则形;叶下表皮气孔为直轴式;果皮薄壁细胞中含草酸钙方晶。
结论:
1.通过对11批苦皮藤药材的质量控制方法研究，建立了苦皮藤药材的质量控制方法，提升了苦皮藤药材的质量标准;对3批粉背南蛇藤药材的质量控制方法研究，初步建立部分质量控制方法，由于本次样本量小，其质量标准还有待进一步研究。
2.对苦皮藤的药效学研究表明，该药材水提物无明显镇痛、抗炎作用，醇提后的各萃取部位按含苦皮藤原生药材含量计算，石油醚部位经口LD50值和乙酸乙酯部位、正丁醇部位、剩余部位及醇提后水煎煮部位对小鼠经口的最大耐受量均高于人临床用量的200倍以上，说明该药短期口服给药较为安全;乙酸乙酯部位和正丁醇部位有明显的镇痛、抗炎作用，该作用对风湿性炎症具有一定的对症治疗作用，该实验为苦皮藤药材在抗风湿活性方面的进一步研究奠定了基础。
3.对苦皮藤、粉背南蛇藤及近缘种灰叶南蛇藤、显柱南蛇藤和短梗南蛇藤五种药用植物的显微鉴别比较，为5种植物的鉴别提供了参考。
为提升《贵州省中药材、民族药材质量标准》(2003版)收载品种南蛇藤根药材(来源为苦皮藤Celastrus angulatus Maxim.和粉背南蛇藤Celastrus hypoleucus(Oliv.)Warb.ex Loes.的根)的质量标准，分别对该两个来源药材进行质量控制方法研究，研究过程中发现，两个来源种的资源量差异极大，苦皮藤资源分布广泛且蕴藏量丰富，粉背南蛇藤分布狭窄且资源量极少。因此课题组除了进行两个药材的质量控制方法研究;也对资源丰富的苦皮藤进一步进行药效学初步研究;同时对苦皮藤和粉背南蛇藤及近缘种灰叶南蛇藤(Celastrus glaucophyllus Rehd.et Wils.)、显柱南蛇藤(Celastrus stylosus、Wall.)和短梗南蛇藤(Celastrus rosthornianus Loes.)五种药用植物进行系统的显微鉴别比较研究，为进一步开发利用苦皮藤药用资源奠定基础，为苦皮藤和粉背南蛇藤及几个近缘种的鉴别提供参考。
方法:
1.按照《中国药典》(2015版)质量标准要求的研究内容，对南蛇藤根药材的两个来源苦皮藤和粉背南蛇藤分别进行系统的性状鉴别，显微鉴别，水分、灰分检查及浸出物测定;分别用薄层色谱法和高效液相色谱法，以儿茶素和表儿茶素为指标性成分对苦皮藤进行定性鉴别和含量测定，以南蛇藤素和扁蒴藤素为指标性成分对粉背南蛇藤进行定性鉴别和含量测定。
2.采用小鼠醋酸扭体法、小鼠急性耳廓肿胀法、小鼠棉球肉芽肿法研究苦皮藤药材水提物及醇提后不同萃取部位对小鼠的镇痛、抗炎作用;利用经典急性毒性试验法研究苦皮藤醇提后不同萃取部位对小鼠的急性毒性情况。
3.分别对苦皮藤、粉背南蛇藤及近缘种灰叶南蛇藤、显柱南蛇藤和短梗南蛇藤五种药用植物进行粉末制片、叶上下表皮表面制片，对根、茎、叶、果实进行石蜡包埋横切制片，利用显微镜观察记录特征，归纳总结每种植物的显微特征并比较种间差异。
结果:
1.通过对南蛇藤根药材的两个来源苦皮藤(11批)和粉背南蛇藤(3批)的质量控制方法研究，得出以下结果:①总结归纳了苦皮藤药材的性状鉴别特征和显微鉴别特征;薄层色谱法鉴别苦皮藤药材的方法稳定、可靠:测定结果规定该药材的水分不超过14.O％、总灰分不超过6.5％、酸不溶性灰分不超过5.5％、醇溶性浸出物不少于19.0％;高效液相色谱法测定11批该药材中儿茶素和表儿茶素的含量，暂定苦皮藤药材中儿茶素和表儿茶素的含量分别不低于0.1％和0.06％。②总结归纳了粉背南蛇藤药材的性状鉴别和显微鉴别特征;薄层色谱法鉴别粉背南蛇藤药材的方法稳定、可靠;根据3批药材的检查结果，水分平均值为10.61％、总灰分平均值为4.95％、酸不溶性灰分平均值为2.50％、水溶性浸出物平均值为15.52％;高效液相色谱法测定该药材中南蛇藤素和扁蒴藤素的含量，3批药材中南蛇藤素和扁蒴藤素的百分含量平均值分别为0.093％和0.0064％;由于粉背南蛇藤样品批次较少，检查项及含量测定项的数据范围较窄，暂无法做限度规定。
2.药效学实验结果显示:苦皮藤药材的水提物不能明显减少小鼠的扭体次数、不能明显抑二甲苯致小鼠耳廓肿胀和小鼠棉球肉芽肿的增生;将药材醇提后萃取的不同极性部位中，石油醚萃取部位对小鼠灌胃给药的LD50为157/kg，乙酸乙酯、正丁醇萃取部位、剩余部位和醇提后水煎煮部位对小鼠的最大耐受量分别为258g/kg、304g/kg、298g/kg和250g/kg;在药材醇提后萃取的不同极性部位中，乙酸乙酯和正丁醇萃取部位经口给药能明显延缓小鼠出现扭体的时间，减少小鼠的扭体次数，抑制二甲苯致小鼠耳廓肿胀和小鼠棉球肉芽肿增生。
3.通过对苦皮藤、粉背南蛇藤及近缘种灰叶南蛇藤、显柱南蛇藤和短梗南蛇藤五种植物的显微鉴别研究，总结归纳了五个种间的显微鉴别特征如下:①苦皮藤:根的皮层较窄，中心无髓;茎横切面形成层类圆形，髓部的薄壁细胞内含草酸钙簇晶;叶上表皮中心有粉红色小点，叶下表皮气孔为直轴式;果实横切面胚乳细胞呈多角形;②粉背南蛇藤:根的皮层宽广，约占1/2;叶横切面薄壁细胞含色素块，叶下表皮气孔为直轴式;果实中果皮薄壁组织内有紫色块状物散在;③灰叶南蛇藤:根的皮层较窄，中心无髓;茎的形成层呈不规则形，木质部导管排列成环状，横切面髓部的薄壁细胞内含草酸钙簇晶:叶下表皮气孔为直轴式，果实横切面胚乳细胞呈多角形;④显柱南蛇藤:根的皮层较窄，中心有髓，横切面的木栓层外侧有气孔，髓部的薄壁细胞内含草酸钙簇品;叶下表皮气孔为平轴式:⑤短梗南蛇藤:根的皮层较窄，中心有髓，横切面的木栓层外侧有气孔;叶上表皮细胞呈较大的类波状不规则形;叶下表皮气孔为直轴式;果皮薄壁细胞中含草酸钙方晶。
结论:
1.通过对11批苦皮藤药材的质量控制方法研究，建立了苦皮藤药材的质量控制方法，提升了苦皮藤药材的质量标准;对3批粉背南蛇藤药材的质量控制方法研究，初步建立部分质量控制方法，由于本次样本量小，其质量标准还有待进一步研究。
2.对苦皮藤的药效学研究表明，该药材水提物无明显镇痛、抗炎作用，醇提后的各萃取部位按含苦皮藤原生药材含量计算，石油醚部位经口LD50值和乙酸乙酯部位、正丁醇部位、剩余部位及醇提后水煎煮部位对小鼠经口的最大耐受量均高于人临床用量的200倍以上，说明该药短期口服给药较为安全;乙酸乙酯部位和正丁醇部位有明显的镇痛、抗炎作用，该作用对风湿性炎症具有一定的对症治疗作用，该实验为苦皮藤药材在抗风湿活性方面的进一步研究奠定了基础。
3.对苦皮藤、粉背南蛇藤及近缘种灰叶南蛇藤、显柱南蛇藤和短梗南蛇藤五种药用植物的显微鉴别比较，为5种植物的鉴别提供了参考。