盐胁迫下水稻脂质组学研究

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植物全脂质中的鞘脂和磷脂是植物细胞膜的重要组成部分,甘油酯是植物光和膜的重要成分,它们在维持膜结构完整和功能完整性方面起关键作用。细胞膜是植物在逆境胁迫下抵御不良因素的第一道屏障,因此,植物通过长期进化使其可以随外界环境变化而自主地改变细胞膜脂质的含量及组分进而提高植物在逆境中的生存能力。GIPC(葡萄糖磷脂酰肌醇神经酰胺)是植物中最丰富的鞘脂,在抗逆过程中起重要作用,ipcs合成酶是GIPCS生物合成的关键酶,在盐胁迫条件下,植物可以通过上调ipcs的表达来增加IPC的合成。已有相关研究表明,位于质膜上的GIPC可以和Na+结合打开Ca2+通道,这一盐敏感机制可能意味着质膜脂参与了对不同环境盐水平的适应,可用于提高作物的抗盐性。在本研究中,我们以“93-11”常规型籼稻和“海稻86”耐盐性籼稻两种水稻品种为材料,通过比较ipcs基因在两种水稻中不同生长条件下的表达水平从而进一步推测ipcs家族基因类型,通过提取分析水稻全脂质的含量和组分变化差异进而研究其在盐胁迫条件的响应机制,从而为提高水稻的抗逆能力和产量提供理论依据。结果如下:1.在正常生长条件下,“海稻86”与“93-11”相比,叶片较窄且细长,生长3周的“海稻86”虽比“93-11”长势略快,但其同等数量叶片重量轻于“93-11”,生长3周的常规型水稻“93-11”叶片宽,颜色深绿。其茎和“海稻86”相比也较粗壮。用100mmol/LNaCl处理生长3周的两种水稻幼苗,“海稻86”与“93-11”相比有更强的抗盐表型。2.以100mmol/LNaCl处理3周大小的两种水稻幼苗,分时间点采样后测定其含水量、丙二醛、可溶性糖、脯氨酸的含量变化。发现两种水稻在处理前后含水量变化基本一致;而丙二醛和可溶性糖含量随着处理时间的延长表现出先升高后降低的趋势,脯氨酸含量随着处理时间延长表现出持续升高的趋势。3.以100mmol/LNaCl处理3周大小的两种水稻幼苗,分时间点采样后测定其基因的表达情况。发现“93-11”常规型水稻中的Os IPCS01g(Os IPCS1)和Os IPCS05g(Os IPCS3)基因表达量的变化波动比较大。都出现了应激性的显著增加随后又减少的现象,但其下降之后的表达量仍高于对照组;而Os IPCS05g(Os IPCS2)基因的表达量随处理时间的延长而缓慢上升。在0-9小时内无下降趋势。但在海稻86耐盐性水稻中Os IPCS基因表达量无明显变化。推测在应对盐胁迫时,“93-11”比“海稻86”具有更加敏感的分子响应机制。4.以100mmol/LNaCl处理3周大小的两种水稻幼苗4h后,利用质谱技术共检测到24种两种水稻的脂质差异代谢物,可分为三大类,包括磷脂类、鞘脂类、甘油脂类,其中磷脂类包括膜磷脂和溶血磷脂两种。在鉴定种类上,TAG鉴定的种类最多,LPS最少;在平均含量上MGDG的平均含量时最高的。植物神经酰胺(Phyto Cer t18:1/h24:0),葡萄糖基磷脂酰肌醇神经酰胺(GIPC t18:0/h22:1),葡萄糖神经酰胺(Glu Cer t18:1/h26:0),是86-0、86-100、9311-0、9311-100四组间差异最显著的前三个代谢物。值得强调的时,这三个代谢物均属于鞘脂类,因此推测鞘脂在植物应对盐胁迫的响应机制具有重要作用。
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