植物开放式组织培养与工厂化育苗新模式的研究

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本试验于2003~2005 年在山东农业大学、济南天缘健生物科技有限公司和山东金秋种业有限公司进行。针对当前植物组培过程中出现的操作程序烦琐、污染严重、培养成本高、移栽成活率低等问题,以多种植物(包括花卉、果树、蔬菜、绿花树种、水草等)作为试材,在广谱性抑菌剂抑生素的基础上,对植物组培技术体系进行了系统的简化研究,成功建立起了一种植物开放式组织培养新模式,从根本上简化了组培环节,降低了组培成本。在此基础上,对工厂化育苗技术体系进行了优化调整,建立起了一套实用性强的高效工厂化育苗技术体系。主要结果如下:1. 抑生素的研发和药效试验1.1 运用辨证的中医理论,遵循中药药性配伍的君、臣、佐、使原则,从多种植物中提取具有有杀菌、抗菌活性物质,成功研制出了具有广谱性杀菌能力的抑生素。1.2 通过自然落菌和人工接菌试验确定了抑生素对散生菌落的有效杀灭浓度在0.3%,对菌团的有效杀灭浓度为1.9%。2. 开放组培新模式的建立 通过抑生素的使用,对植物组织培养各环节进行了彻底简化改造,成功建立了植物开放式组培技术新体系,具体结果如下:2.1 培养容器的选择开放组培不需高压灭菌,我们选用一次性塑料口杯作为培养容器,用PE 保鲜膜封口。2.2 抗菌培养基的制备培养基煮好后,加入各种营养元素,根据不同培养目的,加入不同浓度的抑生素代替高压灭菌,然后调pH 到5.6-5.8,分装到培养杯,用PE 保鲜膜封口,封口时间不能超过1h。2.3 接种器具的灭菌传统组培中,接种用的剪子、镊子、刀片等均采用高压灭菌或酒精灯灼烧灭菌,而在开放组培中,接种器具用75%酒精擦洗后,放在20%抑生素溶液浸泡1h,接种过程始终浸泡在抑生素溶液中,就可有效防止由于接种器具引发的污染。2.4 接种与培养接种室用75%酒精降尘、紫外灯照射30min 后,用75%的酒精将接种台面和手擦干净,揭开封口膜一角,用已灭菌的接种器具,把材料接种到培养基,然后再将杯口封严。将已接好的植物材料置于培养
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