蓝雪花(Plumbago auriculata)植物组织培养技术研究

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蓝雪花(Plumbago auriculata)结实率低,种子价格较为昂贵,扩繁系数低、造成目前传统繁殖方式已无法满足蓝雪花的应用需求。组织培养技术可以克服传统繁殖方法的不足之处,在相对短的时间内可大量生产优良品种,并能促进利用遗传转化技术来提高原品种的质量和选育新品种。本文以蓝雪花为试验材料,探讨了外植体的选择、外植体的消毒、基本培养基的选择以及以茎段为外植体时不同生长调节物质在单芽诱导、丛芽增殖、诱导生根以及愈伤组织诱导、增殖等过程中的作用。实验结果如下:1.和叶片相比,茎段是较佳的外植体材料。在出愈率和出芽率上,茎段均远高于叶片。2.MS培养基比WPM培养基更适宜于蓝雪花的植物组织培养。3.外植体的消毒试验显示,70%的酒精处理45s后再用0.1mg/L升汞处理10分钟为茎段消毒的最佳处理方法。4.通过无菌短枝扦插途径诱导蓝雪花单芽发生试验发现,6-BA、NAA、IAA和2,4-D对幼嫩茎段诱导单芽的影响不同,其中对单芽诱导作用影响最显著的是6-BA,2,4-D的影响次之,NAA和IAA对单芽诱导的影响都较低。试验结果显示诱导单芽的最佳培养基为MS+0.4mg/L6-BA。5.6-BA, NAA、KT和IAA对丛芽诱导、增殖影响显著,其中对诱导作用影响最显著的是6-BA。MS+1.Omg/L6-BA+0.3mg/L NAA+0.5mg/L IAA是蓝雪花丛芽诱导和增殖的最佳培养基,该培养基中丛芽增殖率最高,为506.67%,且生长情况良好,粗壮矮密。6.生根试验发现,蓝雪花无根幼苗在不同IBA和NAA配比的生根培养基中均可诱导生根,但生根时间及根的生长状态明显不同。在整个生根正交试验中,1/2MS+0.3mg/L NAA诱导生根效果最好,生根时间最早,生根率最高,为90.00%。7.通过器官发生途径诱导蓝雪花愈伤组织发生试验发现,2,4-D对愈伤组织诱导作用最明显。MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/L NAA+0.06mg/L IAA+1.0mg/L2,4-D是诱导愈伤组织发生的最佳培养基,在此培养基中,外植体材料的出愈率最高,但蓝雪花愈伤组织不能进行继代增殖培养。
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