瘦素逆转CLA诱导的小鼠代谢障碍的免疫组织化学观察

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瘦素(Leptin)是由脂肪细胞分泌的一种蛋白质激素,可以减少能量的摄入,增加能量的消耗。Leptin通过与其受体结合,通过信号转导发挥生理学作用。本实验以CLA诱导的代谢障碍的小鼠为模型,采取免疫组织化学的手段研究Leptin干预动物肝脏代谢相关基因表达的变化。在饲料中添加CLA后,成功诱导出高血糖、高血脂、脂肪肝等代谢障碍指标。实验分为对照组亚油酸组(LA组)和实验组亚油酸组实验对照组CLA+生理盐水组(CLA+S)、实验组CLA+瘦素组(CLA+L)。昆明小鼠在21d断奶后,开始饲喂添加LA和CLA的鼠粮,饲喂42d后,LA组不做处理,CLA+S组背部皮下加生理盐水缓释泵,CLA+L组背部皮下加Leptin(1mg/mL)缓释泵,作用14d后,取肝脏后做免疫组化试验。结果显示,CLA组小鼠与LA组相比,与糖代谢相关的Akt、p-AKT、FOXO1的表达量下调,而在CLA+L组,Akt、p-AKT、FOXO1的表达量上调。由此可知,CLA对这几个基因表达有所抑制,使胰岛素信号通路不能顺利的传导,从而出现高血糖和胰岛素抵抗的现象。CLA+L组与CLA+S相比,这些基因的表达升高,说明瘦素可以调节这些基因的表达从而改善体内的糖代谢紊乱。瘦素可以促进胰岛素下游信号的传递与表达而发挥调节糖代谢的作用。瘦素通过与其受体结合,通路下游的p-STAT3,CLA+L组与CLA+S相比表达量显著升高(p<0.05),瘦素信号通路信号转导加强。在糖异生方面起重要作用的关键酶G-6-Pase,CLA+S组与LA组相比,表达量显著下降(p<0.05),糖异生活动减弱;CLA+L组与CLA+S组相比,表达量显著升高(p<0.05),糖异生活动增强。脂代谢方面,CLA+S组与LA组相比,CLA+S组SRB1的表达显著降低(p<0.05),CD36的表达显著升高(p<0.05)。表明CLA可以降低SRB1的表达同时可以上调CD36的表达。推测SRB1参与的胆固的逆转运活动增强,CD36表达量的升高,使长链脂肪酸的摄入增加,在肝脏内堆积从而形成脂肪肝。CLA+L组与CLA+S组相比,SRB1的表达显著升高(p<0.05),下调CD36的表达。说明,SRB1参与的胆固的逆转运活动减弱,CD36介导的长链脂肪酸的摄入减少。
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