论文部分内容阅读
目的：观察不同浓度的姜黄素对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响以及对PPAR-γ及TGF-β1表达的影响。初步探讨姜黄素诱导胃癌细胞SGC-7901中PPAR-γ表达的可能机制。方法：通过常规体外培养胃癌细胞SGC-7901，取对数生长期细胞进行实验。分别加入0μmol/L，5μmol/L，10μmol/L，20μmol/L，40μmol/L，80μmol/L的姜黄素作用于胃癌细胞SGC-790124h、48h、72h及浓度分别为5ng/mL，10ng/mL，15ng/mL的外源性TGF-β1与40μmol/L（约为IC50）的姜黄素共同作用于胃癌细胞SGC-790148h，其中0μmol/L的姜黄素浓度组为空白对照组。四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定姜黄素对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响。使用RT-PCR法及免疫细胞化学法测定胃癌细胞SGC-7901中的PPAR-γ及TGF-β1的mRNA及蛋白的表达以及40μmol/L的姜黄素与不同浓度的外源性TGF-β1共同孵育下对PPAR-γ mRNA及蛋白的表达变化。结果：1.MTT结果显示了胃癌细胞SGC-7901在不同浓度（0，5，10，20，40，80μmol/L）的姜黄素处理24h、48h、72h后，随着浓度及作用时间的增加，对胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制率逐渐增加,在80μmol/L的姜黄素作用72h后，其对胃癌细胞SGC-7901增殖的抑制率达到最高值,不同浓度组之间及不同时间组之间的抑制率对比，差异均有统计学意义（P<0.05）。由此表明姜黄素能抑制胃癌细胞的增殖，且存在浓度及时间依赖性。2.RT-PCR法及免疫细胞化学法检测得到姜黄素诱导胃癌细胞SGC-7901中PPAR-γ的mRNA及蛋白表达随着姜黄素的浓度增加呈递增趋势，而TGF-β1的mRNA及蛋白表达呈递减趋势。40μmol/L的姜黄素作用48h后的PPAR-γ及TGF-β1的mRNA分别为：0.45±0.012，0.69±0.013,则蛋白分别为：0.168±0.003,0.064±0.007，与空白对照组对比差异均有统计学意义（P<0.05）。表明在胃癌细胞SGC-7901中，随着姜黄素浓度的递增，PPAR-γ呈现高表达，而TGF-β1呈现低表达,且二者的表达呈负相关性。3.使用不同浓度（5、10、15ng/mL）的外源性TGF-β1和40μmol/L的姜黄素共同作用于胃癌细胞SGC-7901后，RT-PCR及免疫细胞化学法分别检测PPAR-γ的mRNA及蛋白表达，结果显示随着外源性TGF-β1的浓度增加PPAR-γ的mRNA及蛋白表达均呈下降趋势，各浓度组之间差异有统计学意义（P<0.05），而各组分别与空白对照组及40μmol/L的姜黄素组对比，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论:1.姜黄素可以抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖，存在时间及浓度依赖性。2.随着姜黄素的浓度的增加，胃癌细胞SGC-7901中PPAR-γ的表达增加，而TGF-β1的表达反而下降，均呈浓度依赖性，且二者的表达呈负相关性。3.随着外源性TGF-β1浓度的增加，胃癌细胞SGC-7901中PPAR-γ的表达呈下降趋势，提示姜黄素可能通过抑制TGF-β1的表达来诱导PPAR-γ的表达。