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背景玻璃体积血(vitreous hemorrhage,VH)并非单独存在的病变,而是多种病变后血液渗入眼内破坏视力的一种常见并发症。不同病因所致后果各异,血液吸收的快慢与出血部位、出血量、玻璃体状态及视网膜脉络膜功能等因素有关。少量、视网膜附近的出血,多能较快消散;量大则吸收艰难,而玻璃体液化或手术切除术后,吸收明显加快,但也会加快并发症的出现。依照原发病、积血量及眼部情况等选择恰当的临床处理多能有效恢复。然而,目前临床上针对玻璃体积血的病情演变及其对玻璃体视网膜的毒性作用仍没有达成共识。目的1.研究玻璃体积血动物模型构建后各个阶段病程进展、玻璃体生物力学、理化特征及玻璃体视网膜界面(vitreoretinal interface,VRI)超微结构的变化,为临床把握玻璃体积血的病程、手术时机窗的选择及并发症的避免提供参考依据。2.对照兔眼血液注入后不同时间节点视网膜电图波幅和视网膜各层超微结构的变化,观察玻璃体积血对视网膜功能的影响和转归,为寻求视网膜免受损伤的途径、手术干预时机和方法,以及预后评估提供参考。方法1.取新西兰大白兔32只,设定右眼为研究眼,自体全血0.2ml玻璃体腔内注射构建玻璃体积血模型,左眼为对照眼。随机分为4组,分别于建模后第3天、7天、14天及30天选取1组采用裂隙灯、检眼镜及依据Forrester法观察判断不同阶段玻璃体积血吸收情况,再取玻璃体液测定玻璃体液化程度和黏度等生物力学特征,随后比较玻璃体的电解质、总蛋白、PCT及bFGF等生化指标改变,最后探讨VRI的超微结构。2.选新西兰大白兔8只建立玻璃体积血动物模型后,分别于术后第3天、7天、14天及30天充分散瞳并暗适应,借助多焦点视电记录系统(RETI-Scan型)记录视网膜电图(electroretinogram,ERG)波形振幅。最后处死动物立即摘取眼球,选取后极部和赤道部脉络膜视网膜2mm×5mm按常规制作成电镜标本,透射电镜下观察视网膜各层超微结构情况。结果1.自然病程转归经独立样本t检验,各时间点双眼间眼压差异均无统计学意义(P>0.05)。建模后3天积血凝结,边界清晰,红光反射消失;建模后7天玻璃体混浊,眼底模糊;建模后14天积血色浅,可见膜状物,玻璃体液化及后间隙透明,视网膜前可见环状混浊物;建模后30天,积血边界缩小模糊,无血凝块,色相对稍暗。Forrester法分级:所有研究眼建模后3天为ⅠⅡ级,建模后7天和14天以ⅡⅢ级为主,建模后30天多为Ⅳ级,而对照眼各阶段均以Ⅴ级为主。2.生物力学特性建模后7天、14天及30天三个时间点两眼液化程度差异均有统计学意义(P<0.05)。研究眼不同阶段相比,以建模后3天为基准,后三个时间点液化程度明显增高(P<0.001)。而对照眼液化程度也稍有增加趋势,t检验示建模后30天与建模后3天差异有统计学意义(P<0.05)。黏度对比,经t检验得出各时间点双眼丝束长度差异均有明显统计学意义(P<0.001)。3.生化研究研究眼术后3天Fe2+、K+及TP即明显升高,独立t检验示双眼差异具有统计学意义(P<0.05);术后7天时上述各项指标均继续上升达峰值;而术后14天及30天各项指标基本恢复,接近对照眼(P>0.05)。bFGF逐渐升高,t检验示造模后14天差异开始具有统计学意义(P<0.05)。4.扫描电子显微镜VRI超微结构SEM见研究眼建模后3、7、14及30天不完全性PVD分别占1/8(12.5%)、2/8(25%)、5/8(62.5%)及6/8(75%),完全性PVD分别占0/8、1/8(12.5%)、1/8(12.5%)及2/8(25%);而对照眼各个阶段均无PVD出现。研究两眼不完全性PVD情况,研究眼于术后3天即有出现(1/8),但术后14天时发生率显著升高(5/8),两眼差别具有统计学意义(P<0.05)。5.视网膜电图波幅改变研究眼于术后3天在标准闪光源诱发下ERG波幅均消失,而强闪光源照射时ERG波形可引出。标准闪光下,建模后7天ERG的b波逐渐呈现,是对照眼波幅的73.9%;建模后14天b波进一步升高,但仍低于对照眼波幅(P<0.05);最后在建模30天时b波接近于对照眼(P>0.05)。改用强闪光刺激后,研究眼于建模后3天b波振幅(bA)与a波振幅(aA)均明显低于对照眼(P<0.01)。aA于30天接近恢复,与对照眼无显著差异(P>0.05),而对比14天差异有统计学意义(P<0.05);bA于建模后7天开始回升,与对照眼无明显差异(P>0.05),较3天差异有统计学意义(P<0.05),14天和30天接近正常。6.透射电子显微镜下视网膜超微结构TEM观察见研究眼内界膜下有坏死细胞残余,内外核层视神经节细胞内的线粒体肿胀变性呈空泡样,视杆视锥细胞层光感受器核膜不完整,形态松散。而对照眼无明显异常。结论1.玻璃体积血可使兔眼玻璃体结构和功能产生不可逆损害,玻璃体特性2周内改变尚不明显,2周后可有广泛玻璃体液化、PVD和PVR初步形成,玻璃体状态彻底改变,这为临床手术治疗时机窗的确定提供参考依据。2.玻璃体积血后约1周引起轻度可逆性地视网膜功能障碍,1月后视网膜结构局部损伤,但并不干扰功能的发挥,为理论和实践把握玻璃体积血对视网膜的作用提供线索。