致羔羊脑炎肠球菌的分离鉴定及部分生物学特性研究

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肠球菌是人类和动物肠道的正常菌群,通常不引起发病,为一种重要的机会致病菌。近几年来,由于抗生素的滥用,侵入性治疗机会的增加和免疫制剂的广泛使用,使得肠球菌的感染不断上升,成为医院内感染的主要致病菌之一,美国医院感染监视系统(NISS)已将其列为引起医院感染的第二大病原菌,而且肠球菌往往具有天然或获得性耐药以及多重耐药。 本研究从四个发病羊场羔羊脑、肝、脾、心血等组织中分离到革兰氏阳性,菌体成双或成链排列的11株球菌。 11株分离株的API和VITEK-AMS系统生化鉴定结果均为肠球菌,可信度均达9096以上,其中粪肠球菌占6/11(EA、EB、EE、EF、EJ、EK),屎肠球菌占5/11(EC、ED、EG、EH、EI)。 11株分离株的链球菌乳胶凝集分型结果表明:分离株肠球菌既有常规的兰氏D型(EA、EB、EC、ED、EG 5株),又有未见报道的兰氏G群(EK株)和未知血清型(EE、EF、EJ、EH、EI 5株)。 根据肠球菌的高度保守区间tuf基因设计的引物对11株分离株进行PCR扩增,结果表明:11株分离株均能扩增出112 bp的条带,而大肠杆菌,葡萄球菌,马腺疫链球菌和嗜热链球菌扩增不出相应的112 bp条带。 平板法测定11株分离株的溶血性结果表明:对绵羊血和兔血都产生β-溶血现象者占7/11(粪肠球菌3株,屎肠球菌4株),既不溶绵羊血又不溶兔血者占2/11(均为粪肠球菌);而且随着传代次数的增多,分离株的溶血性会逐渐减弱或甚至消失。试验动物的致病性表明:无论粪肠球菌还是屎肠球菌,既溶绵羊血又溶兔血的分离株毒力最强,两者都不溶的毒力很弱,表明溶血性是分离株肠球菌的一个重要的致病因子。 药敏试验结果表明:分离株除对头孢菌素类(头孢噻肟钠),氯霉素类(氟甲砜霉素或氟苯尼考),喹诺酮类(诺氟沙星和恩诺沙星)敏感外;对β-内酰胺类抗生素类(青霉素类和氨苄青霉素),氨基糖甙类抗生素(硫酸链霉素,庆大霉素和卡那霉素),四环素类(四环素和土霉素),大环内脂类(红霉素),盐酸林克霉素等均有不同程度的耐药性。 本研究首次证实了北疆地区致羔羊脑炎耐药性肠球菌的存在。
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