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细菌DNA中含有非甲基化的CpG基序,对哺乳动物细胞的免疫细胞具有免疫刺激效应,而在哺乳动物中,由于CpG基序通常以甲基化的形式存在,所以不具有免疫刺激作用。人工合成的含有非甲基化CpG基序的寡聚核苷酸即CpG ODN可以模拟细菌DNA的免疫刺激效应,提高机体的免疫反应。白色念珠菌是一种条件致病菌。目前,主要通过一些抗真菌药类对此菌引起的相应感染疾病进行治疗,但系统性白色念珠菌感染,服用药物后致死率仍高达70%,因此研制有效的疫苗抵御白色念珠菌的感染十分重要。经研究发现,白色念珠菌热休克蛋白90(HSP90)含有三个抗原表位即B、C和H,其中表位C是保守表位,几乎能与所有系统性白色念珠菌感染的病人血清发生反应,因此将其视为候选疫苗。本实验室构建了含有白色念珠菌热休克蛋白HSP90表位C的重组质粒pD-HSP90C作为核酸疫苗,但其免疫原性较弱,需加入疫苗佐剂以加强免疫效应。本论文对CpG ODN作为白色念珠菌核酸疫苗佐剂是否具有显著的免疫增强效用进行探讨。将CpG DNA基序构建于真核表达载体pcDNA3.1和含有HSP90C的核酸疫苗pD-HSP90C中,形成了pD-CpG和pD-HSP90C-CpG两种重组质粒。将pD-CpG与核酸疫苗pD-HSP90C联合免疫C57BL/6J小鼠、pD-HSP90C-CpG单独免疫小鼠,采用肌肉注射并电转方式,免疫两次,每次间隔时间为两周,第二次免疫两周后对小鼠进行眼球取血,收集血清进行实验研究。运用Western blot实验方法检测免疫小鼠C57BL/6J的抗血清中抗体特异性;ELISA实验测定小鼠C57BL/6J抗血清中特异性抗体IgG、IgG1、 IgG2b的抗体滴度;ELISA试剂盒测定小鼠抗血清中IL-2、IL-4的含量。实验结果表明,pD-CpG与核酸疫苗pD-HSP90C共同免疫小鼠组以及pD-HSP90C-CpG单独免疫小鼠组,其血清中特异性抗体IgG、 IgG2b抗体滴度及IL-2含量明显高于核酸疫苗单独注射组,而特异性抗体IgG1抗体滴度并未增强、IL-4含量降低。pD-CpG联合核酸疫苗pD-HSP90C免疫小鼠与pD-HSP90C-CpG单独免疫小鼠的免疫效果相比无明显差异。本实验结果证明CpG ODN作为疫苗佐剂有效的加强了核酸疫苗pD-HSP90C的免疫效应,增强了Th1型免疫应答,下调Th2型细胞因子的表达,调节Th1/Th2比例,为CpG ODN在疫苗佐剂领域中的应用奠定坚实基础。