【摘 要】
：
目的:证实MAP3K3具有第63位赖氨酸（K63）多聚泛素化修饰现象,探索MAP3K3的K63多聚泛素化修饰以及硼替佐米对卵巢高级别浆液性癌（HGSOC）恶性生物学行为的影响。方法:（1）在HGSOC细胞系SKOV3和A2780中,检测蛋白酶体抑制剂MG-132作用下MAP3K3表达情况;（2）在SKOV3和A2780细胞中,免疫沉淀MAP3K3/K63泛素分子,检测内源性MAP3K3的K63多聚
【基金项目】
：
国家自然科学基金（No.81960465和No.82002741）； 石河子大学高层次人才科研启动专项（RCZK2018C17）；
论文部分内容阅读
目的:证实MAP3K3具有第63位赖氨酸（K63）多聚泛素化修饰现象,探索MAP3K3的K63多聚泛素化修饰以及硼替佐米对卵巢高级别浆液性癌（HGSOC）恶性生物学行为的影响。方法:（1）在HGSOC细胞系SKOV3和A2780中,检测蛋白酶体抑制剂MG-132作用下MAP3K3表达情况;（2）在SKOV3和A2780细胞中,免疫沉淀MAP3K3/K63泛素分子,检测内源性MAP3K3的K63多聚泛素化修饰现象和其多聚泛素化修饰对EGF持续激活的时间依赖性及下游NF-κB信号通路的激活情况;（3）分别构建仅含有第63或48位赖氨酸的泛素分子质粒（HA-Ub-K63-only或HA-Ub-48-only）和仅第63或48位赖氨酸被突变为精氨酸的泛素分子质粒（HA-Ub-K63R或HA-Ub-48R）,共转染His-MAP3K3和上述质粒于HEK 293T细胞中,免疫沉淀His-MAP3K3蛋白,检测外源性MAP3K3连接的K63/48多聚泛素化修饰情况和其多聚泛素化修饰对EGF持续激活的时间依赖性及下游ERK信号通路的激活情况;（4）SKOV3和A2780细胞中分别过表达HA-Ub-K63-only和HA-Ub-K63R后,检测MAP3K3蛋白表达;运用CCK8、平板克隆、Transwell小室实验检测过表达HA-Ub-K63-only/HA-Ub-K63R对细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力的影响;（5）平板克隆实验和Transwell小室实验检测可逆蛋白酶体抑制剂硼替佐米和/或蛋白酶体抑制剂MG-132对SKOV3和A2780细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果:（1）MG-132能够稳定MAP3K3蛋白表达,且对MG-132稳定效益呈时间依赖性（p均＜0.05）;（2）SKOV3和A2780细胞中MAP3K3能够被K63连接的多聚泛素化修饰;EGF能够激活内源性MAP3K3连接的K63多聚泛素化修饰现象;（3）外源性MAP3K3能够被K63而非K48连接的多聚泛素化修饰,MG-132能够阻遏MAP3K3通过泛素蛋白酶体途径降解;EGF能够激活外源性MAP3K3连接的K63多聚泛素化修饰;（4）过表达HA-Ub-K63-only后,SKOV3和A2780中MAP3K3蛋白表达下降,细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力减弱（p均＜0.01）;过表达HA-Ub-K63R后,细胞中MAP3K3蛋白表达无明显改变,细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力无明显变化（p均＜0.01）;（5）硼替佐米孵育后A2780和SKOV3细胞的克隆形成、迁移和侵袭能力降低（p均＜0.05）。结论:MAP3K3具有第63位赖氨酸多聚泛素化链修饰现象,且MAP3K3的K63泛素化促进MAP3K3的降解,进而抑制HGSOC的增殖、迁移和侵袭能力;硼替佐米能够抑制HGSOC细胞的增殖,迁移和侵袭,可能作为治疗卵巢癌的潜在药物。
其他文献
目的:探讨E3泛素连接酶NEDD4L介导MAP3K3的K63连接多聚泛素化修饰的作用机制及MAP3K3的多聚泛素化修饰对卵巢高级别浆液性癌（HGSOC）增殖、迁移和侵袭的影响,初步研究MAP3K3启动子区的甲基化状态对其泛素化的影响,以及NEDD4L表达与HGSOC患者临床病理因素和预后之间的关系。方法:（1）应用Ubi Browser数据库筛选出可能调控MAP3K3泛素化修饰的E3泛素连接酶—N
结合CRH380B型动车组制动系统工作原理，分析常用制动系统和紧急制动系统故障成因，并给出处理措施，以减少应急处置时间，最大程度减小对高铁运输秩序的影响。
现行的教育政策是高中思想政治教育的重要组成部分，也是高中教学内容的重要补充，更是提高学生思想政治教育质量的一项重要活动。现行教育政策要求教师根据教学内容，结合学生的实际情况，选择及时、有思想、有知识的示范性的时政素材。对此，本文旨在推动高中政治的发展，帮助学生养成关心国家大事的好习惯。
报告1例伴窦道形成的Majocchi肉芽肿。患者男，42岁。左小腿多发红斑及溃疡伴瘙痒2个月余。皮肤科检查：左小腿见边界欠清的水肿性红斑，表面有2处浅表性溃疡，直径分别约1 mm和5 mm。溃疡下方伴窦道形成，挤压窦道口可见清亮的渗出液。窦道周围皮肤见粟粒大红色丘疹、丘疱疹及水疱，疱壁薄，疱液清亮，部分破溃伴渗出。皮损组织病理：真皮内可见毛囊周围炎，真皮全层混合炎症细胞、组织细胞及多核巨细胞浸润，
目的本研究通过体外细胞学实验,将探究NIPBL基因在小鼠骨髓间充质干细胞成软骨分化能力的影响,探索TGF-β1/Smad信号通路在Cornelia de Lange综合征模型小鼠骨髓间充质干细胞成软骨分化中的作用和可能机制,探讨NIPBL基因与TGF-β1/Smad信号通路在Cd LS骨骼发育中的相关性,将从分子层面剖析NIPBL基因在Cornelia de Lange综合征发病中的作用机制,为该
阐述了浓缩果汁的特性，以及常用浓缩技术的优缺点，综述了以浓缩果汁为原料发酵果酒的研究现状，并展望了以浓缩果汁为原料发酵果酒的研究方向。
耐磨球是一种使用在磨机中,用于将物料粉碎为更细粒度的研磨介质。近年来,随着国内外大型冶金矿山、火力发电等行业的高质量发展,对高品质耐磨球需求也日趋提高,许多耐磨球公司原先低品质低价的营销策略已无法满足用户对耐磨球的高质量需求。LT公司有着20多年的生产及营销经验,面对不断变化的国内外市场环境,和日益严峻的挑战,企业遇到了市场竞争力的提升的瓶颈期。为了适应市场需要,LT公司必须通过不断地进行技术革新
车端连接处的风挡是影响高速列车气动特性的关键部件。基于雷诺时均法的k-ε方程，建立3节编组的CRH380B型高速列车的稳态流场计算模型，通过风洞试验验证计算模型的准确性，并研究不同形式的风挡结构对高速列车气动特性的影响。研究表明，与其他形式的风挡相比，采用闭合式半风挡的列车在梳理流场迹线和气流方向等方面效果显著，建议在中间车厢连接处采用闭合式半风挡；全封闭外风挡能够有效地控制流场速度分布和减小端面
EQX公司业务发展迅猛,短短七年时间,用户量从零猛增到六千多万,快速扩张的业务倒逼企业人员规模迅速扩张到三百多人。业务复杂度加大、人员规模扩张,企业原来建立的绩效管理方案效用越来越不明显,尤其在企业商业中心,原有的绩效管理甚至变成了一种负担。因此,EQX企业商业中心急需一套行之有效的绩效管理方案,帮助管理人员进行业务和人员管理。为解决上述绩效管理有效性下降的问题,本研究首先对EQX企业商业中心的业