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铜绿假单胞菌是一种环境中广泛分布的条件致病菌,因抗生素滥用,该菌已成为最严重耐药菌之一。铜绿假单胞菌较强的生物被膜形成能力是其产生耐药性的重要原因,目前急需寻找新方法来解决铜绿假单胞菌耐药性问题。噬菌体因其能特异性感染并裂解宿主菌,和安全、高效、研发周期短的特点得到了研究者们的重视。本研究以多重耐药性铜绿假单胞菌为宿主,筛选其裂解性噬菌体并考察其中一株噬菌体对多重耐药性铜绿假单胞菌生物被膜的防控效果。主要工作内容如下:(1)以多重耐药性铜绿假单胞菌为宿主,分离获得三株铜绿假单胞菌裂解性噬菌体分别命名为G1,LS1和C1,透射电镜观察三株噬菌体都为有尾目噬菌体,G1和LS1属于肌尾科噬菌体,C1属于长尾科噬菌体;噬菌体G1潜伏期为20 min,裂解量为230PFU/infected cell,噬菌体LS1和C1的潜伏期约30 min,裂解量分别为77 PFU/infected cell和86 PFU/infected cell;噬菌体G1的pH耐受性范围较宽,为4.0~11.0,LS1在pH值耐受范围为5.0~9.0,C1的pH值耐受范围为6.0~10.0;(2)全基因组测序结果显示三株噬菌体基因组均为双链线性DNA,噬菌体G1基因组大小为87,646 bp,G+C含量为54.7%,有156个基因,其中26个为已知功能基因,含有3个tRNA基因;噬菌体LS1基因组大小为66,093 bp,G+C含量为55.7%,有92个基因,其中35个为已知功能基因;噬菌体C1基因组大小为43,133 bp,G+C含量为53.6%,有59个基因,其中27个为已知功能基因;三株噬菌体都未发现整合酶,毒力因子和抗生素抗性基因;(3)根据噬菌体的宿主谱分析,首先考察噬菌体LS1的生物被膜防控能力。为考察噬菌体LS1对多重耐药性铜绿假单胞菌生物被膜的作用效果,分别用结晶紫染色、活菌计数和扫描电子显微镜法评价噬菌体的作用效果。活菌计数结果显示,噬菌体LS1可以抑制99%的铜绿假单胞菌生物被膜菌生长,能够清除85%的生物被膜菌;扫描显微镜观察结果同样显示噬菌体LS1能清除已形成的铜绿假单胞菌生物被膜;生物被膜菌对噬菌体抗性评价结果显示,噬菌体与生物被膜菌相互作用时,在24 h时会出现对噬菌体LS1抗性菌株。