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大叶风兰是近几年从韩国引进的“香花洋兰”,风兰的根、茎、叶和花都是观赏对象,其具有株型“迷你”,造型奇特,花具异香等特点,越来越受到人们的青睐,市场开发价值较大。尽管在市场上已占据了一定位置,但与蝴蝶兰、大花蕙兰比较,目前应属稀有品种。现在日本、韩国等国家有大量栽培,但我国栽培较少,有关大叶风兰组织培养的研究报道也较少。大叶风兰传统的分株繁殖,一年一株仅繁殖2～3个芽,繁殖系数低,繁殖速度慢、周期长,难以迅速占领市场,满足需求。应用组织培养技术,可以加快繁殖速度,进行工业化生产。我们以新引进的大叶风兰优良品种为材料,进行了组织培养研究,成功地诱导分化形成了再生植株,达到快速繁殖的目的。主要结果如下:1.采用不同的灭菌时间和不同激素组合处理,筛选最佳灭菌时间和最适合花梗腋芽启动培养的激素组合和浓度配比。试验证明,用0.1%HgCl2灭菌,15min是最佳灭菌时间,污染率仅有15%,成活率高达85%,萌芽快,长势好。培养基MS+6-BA2.0mg/L出芽率最高,达90%。2.原球茎诱导技术研究表明,不同外植体对原球茎诱导影响很大,茎尖原球茎诱导率较高,诱导率达到88.5%;不同激素组合对原球茎诱导率影响很大, MS+6-BA4.0㎎/L+NAA0.5㎎/L诱导率最高,达94%;切割茎尖顶端有利于诱导原球茎,诱导率到达96%;大量元素对茎尖原球茎诱导影响很大,MS和1/2MS诱导率较高,达85%以上,以MS的诱导率最高。3.原球茎的增殖研究中,不同激素组合对原球茎增殖效果不同,MS+6-BA3.0㎎/L+NAA0.2㎎/L是原球茎增殖的最佳培养基;添加不同浓度的活性炭对大叶风兰原球茎增殖影响很大,不添加活性炭原球茎褐化严重,不能正常进行增殖,1.5g/L活性炭增殖系数最高,增殖系数达到2.3,继续增加活性炭浓度,增殖系数略有降低;大量元素对茎尖原球茎增殖有一定影响,MS和1/2MS增殖系数较高,没有明显差异,增值系数均在2.1以上;添加不同数量的香蕉汁对原球茎增殖有较大影响,香蕉汁的适宜浓度为10%,增殖系数最高,增值系数为2.3;不同浓度的6-BA和琼脂对原球茎玻璃化程度的影响较大,6-BA达到5.0㎎/L时,玻璃化程度达到Ⅲ级,已经严重影响原球茎分化或继续增殖;琼脂含量不能太低,3.0g/L玻璃化程度加重,3.5g/L以上没有太大影响。4.原球茎的分化生根技术实验表明,不同激素组合培养基对组培苗生根率影响不大,生根率都达到100%,但对平均根数影响较大,用6-BA(1.0㎎/L)和NAA(0.5㎎/L)配合使用作为生根剂较好;大量元素对大叶风兰组培苗生根有一定影响,MS和1/2MS对生根没有明显区别,其中1/2MS平均根数最高,平均根数为3.2。5.试管苗驯化及移栽技术研究表明,利用过渡培养基进行过渡培养能够提高大叶风兰组培苗移栽成活率,比对照提高12.5%;不同炼苗处理对大叶风兰试管苗移栽成活有较大影响,室内炼苗3d+室外炼苗3d这种方式更有利于移栽,移栽成活率达86.5%;苔藓作为栽培基质移栽成活率最高,移栽成活率达到83.3%。