恒古骨伤愈合剂对LPS、TNF-α和PAF诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

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【目的】观察云南彝药恒古骨伤愈合剂对人脐静脉内皮细胞损伤(HUVEC)的保护作用,探讨其对下肢深静脉血栓形成防治的可能机制。【方法】用LPS、TNF-α和PAF诱导HUVEC损伤,采用MTT法观察恒古骨伤愈合剂对HUVEC活性的影响;Fura-2/AM荧光探针负载细胞,用双波长荧光分光光度法测定HUVEC细胞内游离钙离子浓度;用ELISA法测定培养的细胞上清液中t-PA、PAI—1含量的变化。【结果】LPS 300 mg╱刺激内皮细胞48 h、TNF-α20μg╱L刺激内皮细胞24 h、PAF70μmol/L刺激内皮细胞2 h后,可明显降低HUVEC的吸光度A值,细胞内钙离子浓度升高,PAI—1浓度明显升高,与对照组相比,差异有显著性意义(P<0.01),而t-PA浓度无明显变化(P>0.05);各浓度的恒古骨伤愈合剂可升高LPS、TNF-α和PAF引起的HUVEC的A值降低,并呈浓度依赖性地显著降低HUVEC内游离钙浓度的升高(P<0.01);恒古骨伤愈合剂200 mg╱L、100 mg╱L、50 mg╱L组明显抑制LPS、TNF-α、PAF诱导的PAI-1分泌增多(P<0.01),对t-PA无明显影响。【结论】恒古骨伤愈合剂对LPS、TNF-α和PAF诱导的HUVEC损伤具有保护作用,可能与其降低细胞内钙离子浓度有关;恒古骨伤愈合剂抑制PAI—1产生,维持纤溶系统平衡,可能是防治下肢深静脉血栓形成的重要机制之一。
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