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背景与目的:
食管-胃交界腺癌是潮汕地区高发恶性肿瘤之一,淋巴结转移是食管-胃交界腺癌病人治疗失败的主要原因。研究发现,淋巴管生成是肿瘤发生淋巴道转移的必要条件之一,而血管内皮生长因子C(VEGF-C)是重要的促淋巴管生成因子,也可促血管生成,在促进肿瘤淋巴管生成及肿瘤淋巴道转移过程中起着重要作用。本研究以D2-40 标记淋巴管,探讨食管-胃交界腺癌中VEGF-C的表达对淋巴管生成及预后的影响,为筛选预后不良高危病人群及进一步以VEGF-C 为靶点的抗转移生物治疗研究提供依据。
实验标本来自2000年10 月至2002年10 月间在汕头大学医学院附属肿瘤医院行根治性手术治疗的128例食管-胃交界腺癌。
方法:
采用免疫组化Envision 二步法检测石蜡标本切片中VEGF-C和D2-40的表达。LeicaDMRXA2 全能显微镜与Leica IM50 图象采集系统采集图像,Image-Pro ? Plus 6.0 图象分析系统检测VEGF-C的平均光密度(MOD); D2-40 标记淋巴管并计算淋巴管密度(LVD)。
所有病人均行术后随访,中位随访时间是27个月(1-77个月),平均35.57±24.28个月。
统计分析
所有实验数据采用SPSS17.0 统计软件包进行统计学处理。两个独立样本均数差别检验使用t检验,多个样本均数差别检验使用单因素方差分析(One-way ANOVA),单因素生存分析采用Kaplan-Meier 法,组间生存比较采用时序检验(Log-rank test),多因素生存分析采用Cox 比例风险模型。P<0.05 为差异有统计学意义。
结果:
1. VEGF-C、LVD与临床病理参数的关系:VEGF-C 表达于食管-胃交界腺癌细胞胞浆。
VEGF-C 在食管-胃交界腺癌中的表达与N分期、临床分期相关(p<0.05),分期越高,VEGF-C 表达越强;与年龄、性别、肿瘤大小、大体类型、组织类型及T分期无关(p>0.05)。
D2-40 标记的淋巴管主要表达于食管-胃交界腺癌瘤周区,肿瘤中心区表达少。LVD 在食管-胃交界腺癌中的表达与N分期、临床分期相关(p<0.05),分期越高,LVD 表达越强;与年龄、性别、肿瘤大小、大体类型、组织类型及T分期无关(p>0.05)。
2. VEGF-C、LVD与术后送检阳性淋巴结数的关系:以MOD中位值(0.18)为界,将病人分为VEGF-C 高、低表达组(MOD>0.18,≤0.18)。VEGF-C 高表达组术后送检阳性淋巴结数明显高于低表达组,分别为2.9±2.44 枚和2.0±2.36 枚,差别有显著性意义,p=0.025;以LVD中位值(13 条)为界,将病人分为LVD 高、低水平组(LVD>13 条, ≤13条), LVD 高水平组术后送检阳性淋巴结数明显高于低水平组,分别为3.0±2.34 枚和1.9±2.43 枚,差别有显著性意义, p=0.010。
3. VEGF-C 表达与LVD的关系:VEGF-C 高表达组手术标本的LVD 水平明显高于低表达组,两组LVD 平均为16.9±5.96 条和13.6±5.58 条,差别有显著性意义, p=0.002。
4. 单因素生存分析:VEGF-C 低表达组患者无瘤生存情况明显优于高表达组患者,log- rank检验, p=0.000,两组5年无瘤生存率分别为50.0%和17.0%。LVD 低水平组患者无瘤生存情况明显优于高水平组患者,log- rank检验, p=0.000,两组5年无瘤生存率分别为36.3%和18.7%。
5. 多因素分析:COX 比例风险模型显示,术后辅助化疗、肿瘤浸润深度、N分期、VEGF-C和肿瘤远端扩大切除范围为食管-胃交界腺癌预后的独立影响因素。
结论:
1. VEGF-C、LVD 表达均与N分期呈正相关,提示VEGF-C、LVD 可能与食管-胃交界腺癌淋巴结转移有关。
2. VEGF-C 高表达伴随有高LVD 水平,提示VEGF-C 可诱导食管-胃交界腺癌淋巴管生成。
3. 食管-胃交界腺癌中VEGF-C 高表达和高LVD 水平提示预后不良,其中VEGF-C的高表达为独立于其它临床因素的预后不良影响因素,可作为预测食管-胃交界腺癌预后的指标。