地西他滨联合卡麦角林在治疗耐药型泌乳素腺瘤中的相关分子机制研究

来源 :新疆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liongliong509
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目的:研究在细胞体外环境中,甲基化抑制剂地西他滨联合多巴胺激动剂卡麦角林治疗DARPs能否逆转其对多巴胺激动剂敏感性,并检测DNA甲基化调控在耐药性泌乳素细胞腺瘤细胞中的差异表达基因。方法:对大鼠垂体瘤GH3细胞系使用DAC干预,并分别分组进行mi RNA及m RNA高通量测序,通过对比得出差异表达基因,验证并使用生信分析方法确认与D2R相关的差异表达基因。结果:使用RNA-seq和mi RNA-seq数据构建了mi RNA-m RNA调控网路,并且最终比对出了6组靶标基因(mi R-370-3p,Fosl1;mi R-326-3p,Nrbp2;4_30490,Vash1;17_19809,Ikzf3;15_16363,Tpm2;12_11129,Trim7),分别使用文库样本验证上述6个mi RNA和6个m RNA的表达量,结果表明在与对照组相比Tpm2、Nrbp2、Trim7、Vash1基因在实验组中表达量升高,Fosl1、Ikzf3基因在实验组中表达量降低,且Two-way ANOVA有显著性差异,并将6种基因(Tpm2、Nrbp2、Trim7、Vash1、Fosl1、Ikzf3)提取核酸序列与D2DR(human/m Rat)基因样本库做比对,得出结果证实Fosl1基因与D2DR有直接关联。随后对裸鼠进行皮下种植瘤模型实验,分DAC+CAB组及CAB对照组进行实验,提取蛋白进行Western-blot,结果提示DAC+CAB组D2R表达增高,提示DAC对提高DAs敏感性有效。结论:证实Fosl1基因(对应mi R-370-3p)在泌乳素瘤的地西他滨干预下呈现出差异表达,并且其与D2R的表达有直接关联,且证明了地西他滨对改善多巴胺受体激动剂DAs类药物敏感性有一定作用,在今后的耐药型泌乳素腺瘤的研究中提供一种新的思路。
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