微生物脂肪酶在工业上有着广泛的应用。本研究将实验室保存的LipA基因克隆到pHBM905BDM载体,构建了重组质粒pHBM905BDM-LipA,转化毕赤酵母GS115,经功能平板筛选,选取水解圈/菌体直径最大的阳性转化子,进行摇瓶发酵,对上清SDS-PAGE分析表明,甲醇诱导168h表达量达到最高,为294mg/L,首次实现了 LipA在真核表达系统中的表达。用镍柱对LipA纯化,并对所纯化的酶进行酶学性质的分析,结果表明,LipA对酰基链长分别为8和12的甘油三酯具有更高的水解选择性,其最适反应pH为8.0,最适反应温度为40℃。在25-45℃范围及碱性条件(pH7.5-9.0)下,LipA分别保留70%以上和60%以上的残余活性,但对酸性条件及高温比较敏感。Mn2+和Mg2+对LipA的活性具有非常显著的促进作用;表面活性剂SDS及Tween20对LipA有明显的抑制作用,但0.1%和0.05%TritonX-100对LipA有显著的激活作用。有机溶剂耐受性分析表明,LipA对多种有机溶剂均表现出较好的耐受性,为实现其在生物柴油制备中奠定了良好的基础。