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目的研究和厚朴酚对线粒体可溶蛋白诱导小胶质细胞活化的抑制作用。方法BV2小胶质细胞复苏后加入完全培养基（10%FBS-DMEM），置于5%CO2培养箱内常规培养，取对数生长期，随机分为3组:(1)空白对照组（control）:加无血清培养基；(2)线粒体可溶蛋白组(MDP):接种24h后行1μg/ml、10g/ml、100μg/ml浓度MDP按1、3、5、7h处理。(3)和厚朴酚干预组(HNK):和厚朴酚孵育30min后行MDP处理，且和厚朴酚存在于MDP作用整个过程。ELISA分别检测以0μg/ml、1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml浓度MDP刺激7h时的细胞上清液中白细胞介素IL-6和TNF-α含量；和以MDP为100μg/ml处理1、3、5、7h白细胞介素IL-6和TNF-α含量；根据前两组结果，检测HNK组与MDP组的白细胞介素IL-6和TNF-α含量；采用RT-PCR方法半定量测定空白对照组、MDP组与HNK组转录因子Klf4的表达情况；倒置相差显微镜观察各组细胞形态变化及免疫荧光染色显示IBA1蛋白的表达情况。结果1. ELISA结果:当MPS浓度为1μg/ml处理7h时，与对照组比较细胞上清液中白细胞介素IL-6和TNF-α含量表达差异无统计学意义（p>0.05）；当MPS浓度为10μg/ml或100μg/ml处理7h时，组间差异有统计学意义（p<0.05），提示小胶质细胞激活呈现一定的浓度依赖性；当MPS为100μg/ml时，在1、3、5、7h各时间点细胞上清液中白细胞介素IL-6和TNF-α含量表达水平与空白对照组比较组间差异有统计学意义（p<0.05），提示随着刺激时间的延长，小胶质细胞活化程度增强，当MPS为100μg/ml时处理7h时，检测HNK组与MDP组的上清液中白细胞介素IL-6和TNF-α含量有明显统计学差异（p<0.05），提示和厚朴酚能够抑制小胶质细胞的活化，降低了炎性介质的释放。2. RT-PCR结果：MDP组与空白组和HNK组比较组间差异均有统计学意义，说明线粒体可溶蛋白刺激小胶质细胞后Klf4明显上调，而和厚朴酚能下调活化的小胶质细胞Klf4表达。2.形态学观察：倒置相差显微镜观察到空白组细胞主要表现为胞体较小，突起呈分枝状；MDP组明显表现为小胶质细胞的胞体变圆或者椭圆，突起消失，呈“阿米巴”状。而HNK组活化状态的小胶质细胞明显减少。荧光显微镜下观察免疫荧光染色BV2小胶质细胞在无MDP刺激的情况下，Ibal蛋白没有表达。MDP组小胶质细胞的Ibal蛋白明显表达，胞体变圆或者椭圆，突起消失，呈“阿米巴”状。证明了线粒体可溶蛋白可以激活小胶质细胞，而和厚朴酚能够降低小胶质细胞活化程度。结论1.线粒体可溶蛋白可以激活小胶质细胞，促进白细胞介素IL-6和TNF-α的释放,并且其激活作用具有一定的浓度和时间依赖性；2.和厚朴酚能够有效地抑制线粒体可溶蛋白诱导的小胶质细胞活化，可能的机制是通过下调Klf4的表达。