肿瘤是严重危害人类健康的疾病，目前治疗肿瘤的两种常用方法——化学治疗和放射治疗，都存在着较大的毒副作用，寻找治疗效果好且毒副作用小的肿瘤治疗药物已成为当务之急。研究发现，一些细菌毒素具有抗肿瘤活性，在肿瘤治疗方面显示了诱人的前景。艰难梭菌是一种可以引发相关性腹泻的革兰氏阳性芽孢杆菌，其主要致病因子是两种大蛋白外毒素：毒素A（Tcd A，308 kD）和毒素B（Ted B，270 kD）。长期以来，Tcd B被看作是一种Tcd A依赖性毒素而受到研究人员的忽视，但近年来在一些地区检测到了Tcd A（-）Tcd B（+）病例，使Tcd B的细胞毒性引起研究人员的关注，目前国外已有其引发人类上皮细胞（包括肿瘤细胞）损伤和凋亡的报导，但国内尚无相关报导。　　 研究目的：本实验采用重组艰难梭菌毒素B（recombinant Clostridium difficile toxin B，rTcd B），探讨了其抗肿瘤活性。　　 实验方法：为了研究rTcd B的抗肿瘤活性，本实验选用小鼠结肠癌细胞CT26，进行了以下三个方面的实验。首先，体外rTcd B细胞毒性实验，包括：光学镜检检测rTcd B对肿瘤细胞形态的影响；MTT比色法检测rTcd B对肿瘤细胞的增殖抑制作用；LDH乳酸脱氢酶活性实验检测rTcd B对肿瘤细胞膜的损伤。其次，体外rTcd B诱导细胞凋亡作用实验：荧光显微镜检和流式细胞技术检测rTcd B对肿瘤细胞的诱导凋亡作用。最后，体内动物实验：实验动物采用Balb/c小鼠。rTcd B对肿瘤细胞灭活制成瘤苗，对小鼠进行瘤苗免疫后，再对其进行活细胞攻击，来检测小鼠体内诱发的肿瘤特异性反应。　　 结果表明：首先，艰难梭菌rTcd B对肿瘤细胞具有较强的细胞毒性，能够使肿瘤细胞形态发生显著变化，能够抑制其增殖并损伤细胞膜。10ng/mL rTcd B作用24h以上可以使细胞变圆率达到90％以上，可以使细胞增殖抑制率达到50％以上，可以使细胞膜损伤程度达到80％以上。其次，rTcd B能够诱导肿瘤细胞凋亡，能够使肿瘤细胞膜上的磷脂酰丝氨酸外翻，流式细胞仪检测结果表明，细胞凋亡率呈时间-剂量依赖性增加。体内动物实验研究表明：rTcd B灭活肿瘤细胞制成瘤苗可以在实验动物体内诱发肿瘤特异性免疫反应，使其能够抵制住肿瘤活细胞攻击。通过以上结果表明，艰难梭菌rTcd B具有抗肿瘤活性，在瘤苗制备和实体瘤治疗方面具有重要的开发价值。