红椿离体培养再生体系的建立

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红椿(Toona ciliata)为国家二级濒危保护植物,是我国南方地区发展珍贵人工林的主要树种,而红椿种苗的生产是保障红椿人工林稳步发展的基础。为了探索红椿种苗的规模化生产,解决红椿人工林发展过程中的种苗瓶颈,选取红椿优良家系优良单株为取材植株,以其带芽茎段为外植体,采用完全随机设计、正交设计,并结合极差分析、方差分析、多重比较等方法,研究了外植体消毒、初代诱导、继代增殖、生根培养和炼苗移栽等红椿离体培养再生体系技术环节。结果表明:1)红椿适宜的外植体取材时间为春季或者早夏,约3-6月,可大幅降低外植体消毒时的污染率。2)切割好的带芽茎段外植体先用1%的洗衣粉水浸泡10min,刷洗后用流水冲洗3h,无菌室灭菌前再用0.1%的多菌灵浸泡0.5h。接种前用75%酒精表面消毒20s后用0.1%HgCl2灭菌8min,污染率可降至27.71%,而存活率达到57.86%,可以满足初代培养的需要。3)MS培养基为红椿初代培养的最佳基本培养基,附加6-BA 0.5mg/L与NAA0.01mg/L时,诱导率达到72.17%,平均侧芽高度3.47cm。4)继代增殖最佳培养基为MS+6-BA1.4mg/L+NAA 0.02 mg/L+GA31.0 mg/L,增殖系数为4.70,芽苗平均高度达到了4.27cm。同时,玻璃化现象也得到了明显的改善。5)1/2MS(或1/4MS)+IBA0.1mg/L+NAA0.01mg/L为最适的生根培养基,平均生根率为76.46%,平均生根数为6.37条根,平均根长为8.33cm。6)红椿生根试管苗经炼苗后移栽到配比为黄心土:河沙:蛭石=2:1:1的基质上,移栽成活率可达70%。综上,本研究建立的红椿离体培养再生体系,可以实现红椿种苗的规模化生产,为红椿优质种苗的工厂化生产提供技术基础,推动红椿人工林的发展。
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