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背景和目的:糖尿病肝损伤（diabetic liver injury,DLI）是糖尿病引起的肝脏慢性并发症,严重影响糖尿病患者的生存与生活质量。高血糖引起肝脏糖代谢及脂代谢的紊乱,导致肝脏弥漫性炎症的产生。肝脏巨噬细胞与此炎症产生密切相关,在糖尿病肝损伤的发生发展中发挥关键作用。NLRP3炎症小体（NOD like receptor protein 3 inflammasome）是一种存在于胞质内的多聚蛋白复合物,由NLRP3受体蛋白募集衔接蛋白凋亡相关斑点样蛋白（apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC）以激活半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1（caspase-1）导致成熟白细胞介素1β（interleukin 1β,IL-1β）、白细胞介素18（interleukin 18,IL-18）分泌。研究发现,NLRP3炎症小体在肝脏疾病发展中发挥重要作用,抑制NLRP3炎症小体的表达可以减轻肝脏的炎症,达到保护肝脏的作用。Bruton’s酪氨酸激酶（Bruton’s tyrosine kinase,Btk）属于非受体酪氨酸激酶Tec家族。近年来研究发现,Btk是NLRP3炎症小体激活的关键信号分子。本研究采用链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）诱导糖尿病小鼠模型,探讨巨噬细胞中Btk如何调控NLRP3炎症小体从而参与DLI的发生发展。方法:实验分组:对照组（NC）、糖尿病组（Diabetic）、Btk敲基因组（Btk-/-）、Btk敲基因糖尿病组（Btk-/-diabetic）;采用试剂盒检测小鼠血糖（blood glucose,BG）,血清糖化血红蛋白（glycated hemoglobin,HbA1c）、总胆固醇（total cholesterol,TC）、甘油三酯（triglyceride,TG）、游离脂肪酸（free fat acid,FFA）、谷丙转氨酶（alanine aminotransferase,ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase,AST）及肝组织TC、TG、FFA的水平;HE染色检测各组肝组织病理变化;油红O染色检测各组肝组织脂质积聚情况;免疫组化检测各组肝组织集群分化因子68（cluster of differentiation 68,CD68）及NLRP3表达情况;激光共聚焦检测CD68与Btk、CD68与诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxidesynthase,iNOS）共表达情况;蛋白质印迹法（Western blot）检测各组肝脏组织总蛋白中Btk、p-Btk、iNOS、IL-1β、肿瘤坏死因子-a（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、单核细胞趋化蛋白-1（monocyte chemoattractant protein 1,MCP-1）、NLRP3、ASC、caspase-1表达情况;实时荧光定量PCR法（quantitative real-time PCR,qRT-PCR）测定各组中IL-1β的mRNA转录表达;免疫共沉淀法检测NLRP3与Btk、NLRP3与ASC的相互作用。结果:（1）Diabetic组与NC组比、Btk-/-diabetic组与Btk-/-组比,BG、HbA1c均升高（P<0.05）。（2）与NC组比,Diabetic组ALT、AST均升高（P<0.05）;与Diabetic组比,Btk-/-diabetic组ALT、AST均下降（P<0.05）。（3）HE染色显示,NC组与Btk-/-组肝组织小叶结构完整,肝索排列整齐,Diabetic组观察到桥接坏死,大量炎症细胞浸润,Btk-/-diabetic组观察到肝细胞水肿及散在的点状坏死,少量炎症细胞浸润。（4）免疫组化显示,与NC组比,Diabetic组CD68、NLRP3表达增强（P<0.05）,与Diabetic组比,Btk-/-diabetic组均降低（P<0.05）。（5）激光共聚焦显微镜观察显示,与NC组比,Diabetic组CD68与Btk、CD68与iNOS共表达明显增强;与Diabetic组比较,Btk-/-diabetic组共表达明显减弱。（6）Western blot显示,与NC组比,Diabetic组p-Btk/Btk、iNOS、IL-1β、TNF-α、MCP-1、NLRP3、ASC、caspase-1蛋白表达显著增强,（P<0.05）;与Diabetic组比,Btk-/-diabetic组各蛋白表达明显降低,（P<0.05）。（7）qRT-PCR显示,与NC组比,Diabetic组IL-1β的mRNA转录水平显著升高（P<0.05）;与Diabetic组比,Btk-/-diabetic组IL-1β的mRNA水平明显下调（P<0.05）。（8）免疫共沉淀显示,与NC比,Diabetic组NLRP3与ASC相互作用明显增强;与Diabetic组比,Btk-/-diabetic组两者相互作用明显减弱。结论:Btk基因敲除可以显著减轻糖尿病引起的肝脏炎症,可能是通过下调NLRP3炎症小体形成降低炎症因子的分泌从而减轻糖尿病引起的肝损伤。