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目的:l、利用免疫组织化学荧光染色技术,检测皮肤附属器的特异性抗原,探索完整的皮肤附属器标记物序列;2、探索庞大的角蛋白家族在不同皮肤附属器的差异性表达模式,探索角蛋白家族对于人皮肤附属器的差异表达序列。
方法:通过石蜡包埋技术将人皮肤标本制成0.3mm厚的石蜡切片,将大鼠背部及足垫部皮肤、小鼠背部及足垫部皮肤制成0.3mm厚的石蜡切片,用不同抗原进行免疫荧光染色。1、检测K5、K7、K8、K14、K27、K31、K73、α-SMA、CEA、NKCC1、EMA、Na+/K+-ATPase、AE13在人皮肤各个附属器的表达;2、检测K1、K4、K5、K7、K8、K10、K13、K14、K15、K18、K19、K27、K31、K40、K73、K77角蛋白家族在人皮肤各种附属器的表达模式;
结果:l、通过对人皮肤石蜡切片免疫荧光染色可发现,汗腺表达K5、K7、K8、K14、K27、K31、α-SMA、CEA、NKCC1、EMA、Na+/K+-ATPase,而不表达K27、K73、AE13;毛囊表达K5、K7、K8、K14、K27、K31、K73、α-SMA、AE13,不表达K7、CEA、NKCC1、Na+/K+-ATPase;皮脂腺表达K5、K14、K73、EMA,不表达K7、K8、K31、α-SMA、CEA、NKCC1、EMA、Na+/K+-ATPase。2、利用角蛋白家族抗原对人皮肤石蜡切片免疫荧光染色可发现表皮部位表达K1、K4、K5、K7、K10、K13、K14、K15、K19、K31,不表达K8、K18、K27、K40、K73;汗腺部位表达K1、K4、K5、K7、K8、K10、K13、K14、K15、K18、K77,不表达K27、K40、K73;毛囊部位表达K1、K4、K5、K8、K10、K13、K14、K15、K18、K19、K27、K31、K40、K73、K77;不表达K7;皮脂腺部位表达K1、K4、K5、K7、K10、K13、K14、K15、K73、K77,不表达K8、K18、K19、K27、K31、K40
结论:l、K7、CEA、NKCC1、Na+/K+-ATPase可以作为人皮肤汗腺的特异性标志物;K27、AE13可以作为人皮肤毛囊的特异性标志物;K73可作为毛囊皮脂腺单位特异性标志物。2、各种皮肤附属器均有着较为复杂的角蛋白模式,但它们都表达了自己的特异性,部分角蛋白可以作为其组织特异性标记。例如K73可以作为毛囊皮脂腺单位的特异性标志物,K77可以作为汗腺的特异性标志物,K19仅在汗腺表达,也可作为汗腺的特异性标志物,K27和K40仅在毛囊中表达,可以作为毛囊的特异性标志物。
方法:通过石蜡包埋技术将人皮肤标本制成0.3mm厚的石蜡切片,将大鼠背部及足垫部皮肤、小鼠背部及足垫部皮肤制成0.3mm厚的石蜡切片,用不同抗原进行免疫荧光染色。1、检测K5、K7、K8、K14、K27、K31、K73、α-SMA、CEA、NKCC1、EMA、Na+/K+-ATPase、AE13在人皮肤各个附属器的表达;2、检测K1、K4、K5、K7、K8、K10、K13、K14、K15、K18、K19、K27、K31、K40、K73、K77角蛋白家族在人皮肤各种附属器的表达模式;
结果:l、通过对人皮肤石蜡切片免疫荧光染色可发现,汗腺表达K5、K7、K8、K14、K27、K31、α-SMA、CEA、NKCC1、EMA、Na+/K+-ATPase,而不表达K27、K73、AE13;毛囊表达K5、K7、K8、K14、K27、K31、K73、α-SMA、AE13,不表达K7、CEA、NKCC1、Na+/K+-ATPase;皮脂腺表达K5、K14、K73、EMA,不表达K7、K8、K31、α-SMA、CEA、NKCC1、EMA、Na+/K+-ATPase。2、利用角蛋白家族抗原对人皮肤石蜡切片免疫荧光染色可发现表皮部位表达K1、K4、K5、K7、K10、K13、K14、K15、K19、K31,不表达K8、K18、K27、K40、K73;汗腺部位表达K1、K4、K5、K7、K8、K10、K13、K14、K15、K18、K77,不表达K27、K40、K73;毛囊部位表达K1、K4、K5、K8、K10、K13、K14、K15、K18、K19、K27、K31、K40、K73、K77;不表达K7;皮脂腺部位表达K1、K4、K5、K7、K10、K13、K14、K15、K73、K77,不表达K8、K18、K19、K27、K31、K40
结论:l、K7、CEA、NKCC1、Na+/K+-ATPase可以作为人皮肤汗腺的特异性标志物;K27、AE13可以作为人皮肤毛囊的特异性标志物;K73可作为毛囊皮脂腺单位特异性标志物。2、各种皮肤附属器均有着较为复杂的角蛋白模式,但它们都表达了自己的特异性,部分角蛋白可以作为其组织特异性标记。例如K73可以作为毛囊皮脂腺单位的特异性标志物,K77可以作为汗腺的特异性标志物,K19仅在汗腺表达,也可作为汗腺的特异性标志物,K27和K40仅在毛囊中表达,可以作为毛囊的特异性标志物。