棉铃虫（Helicoverpa armigera）是世界性重大农业杂食害虫，不仅对棉花生产造成严重危害，而且也对我国的粮食安全造成影响。棉铃虫核型多角体病毒（Helicoverpa armigeranuclear polyhedrosis virus，HaNPV）是棉铃虫专一性的病原菌，也是我国第一个注册并在农田里大范围使用的生物农药，其对生态环境污染小，病毒进入棉铃虫体内复制传播后可以有效的杀死棉铃虫，但该病毒在棉铃虫体内传播机制目前仍不清楚。棉铃虫属于无脊椎动物，仅有先天免疫系统，其可以识别非己成分,抵御外来微生物入侵，保证自身的正常生存。在棉铃虫先天免疫中，C型凝集素作为其中的一种模式识别受体在此过程中发挥重要的功能。在棉铃虫中，已经报道的有8个C型凝集素，它们的主要功能是对细菌和真菌的吞噬作用、黑化作用等，但在病毒感染中的作用研究的很少。HaNPVF囊膜融合蛋白作为出芽病毒囊膜表面重要糖蛋白，在病毒侵染宿主细胞过程中发挥重要作用。实验室前期研究结果证实HaNPV感染棉铃虫后，能够诱导Ha-Lectin基因表达上调，并已经成功构建重组表达载体 Pet-30a-Ha-Lectin。　　本文利用分子克隆技术构建了原核重组表达载体Pet-30a-HaNPV F。经IPTG诱导，包涵体蛋白复性，Ni2+亲和柱纯化后获得重组表达蛋白Ha-Lectin和HaNPV F，并利用重组蛋白Ha-Lectin和HaNPV F作为抗原分别免疫家兔和小鼠，制备多克隆抗体。然后通过免疫细胞化学和免疫共沉淀技术检测两种蛋白的体内互作情况。为进一步研究Ha-Lectin在HaNPV感染中的作用，将Ha-Lectin重组蛋白和抗体分别与出芽病毒BV混合孵育后注射到棉铃虫体内，qPCR检测棉铃虫体内病毒的滴度变化。PCR扩增获得717bp的HaNPVF基因目的片段，并经测序证实载体构建成功；SDS-PAGE电泳检测构建的原核重组表达载体，结果显示 Ha-Lectin重组蛋白的分子量约为41KDa，重组蛋白HaNPV F分子量约为34KDa，二者均存在于诱导后的沉淀中；Western-blotting检测结果显示制备的Ha-Lectin和HaNPV F多克隆抗体能够分别特异识别棉铃虫体内Ha-Lectin和HaNPV F；免疫细胞化学实验证实HaNPV F蛋白与Ha-Lectin蛋白存在体内共表达；免疫共沉淀结果证实HaNPV F囊膜融合蛋白能够靶向结合血淋巴中的Ha-Lectin蛋白；qPCR检测结果显示随着Ha-Lectin蛋白浓度的提高，棉铃虫体内病毒的滴度降低。由以上结果可以看出，C型凝集素Ha-Lectin通过与HaNPV F囊膜融合蛋白互作，抑制病毒在棉铃虫体内的增殖。本文从病毒和宿主蛋白互作的角度揭示NPV的感染机制，阐述 C型凝集素在病毒感染中的作用，为寻找新的害虫分子防治靶标提高生物农药的杀虫效果奠定理论基础，同时也具有较大应用价值。