【摘 要】
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该文应用mRNA差异显示技术研究了生理成熟的香菇菌丝在冷刺激后的基因表达差异.当在25℃环境中,于含0.2﹪琼脂的PDB半固体培养基表面大部分已形成褐色菌皮时,提取部分菌丝作为
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该文应用mRNA差异显示技术研究了生理成熟的香菇菌丝在冷刺激后的基因表达差异.当在25℃环境中,于含0.2﹪琼脂的PDB半固体培养基表面大部分已形成褐色菌皮时,提取部分菌丝作为未受冷刺激的对照,然后将其余菌丝移入10℃环境中进行冷刺激,分别在冷刺激0.5h、1h、2h、3h、6h、12h、24h后提取菌丝,去除粘附在菌丝上的琼脂后提取总RNA.用锚定引物和随机引物对提取的RNA进行反转录和PCR反应,再用琼脂糖凝胶电泳进行差异显示,发现在冷刺激6~12小时后基因的差异表达最明显,可能为冷刺激促发香菇菌丝发育的一个关键时段.将差异片段进行纯化和克隆,用地高辛标记制作探针进行Northern杂交筛选,得到差异显示的一个cDNA片段,对该片段进行测序和序列分析后发现是一个蛋白编码区,说明该片段可能是与冷刺激后香菇菌丝体发育相关的一个基因差异表达片段.
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