抗体（Antibody）是机体在抗原物质刺激下,由免疫系统的B细胞产生可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白（Immunoglobulin,Ig）。与此同时,抗体也通过结合抗原、介导细胞毒性效应等方式,参与免疫稳定、免疫监视和免疫防御等重要的生物学过程,在人体免疫反应中发挥不可或缺的作用,可广泛应用于疾病的诊断、预防和治疗,成为生物学等众多学科研究的热点。抗体生产技术根据历史可分为四个阶段,分别是多克隆抗体、单克隆抗体、基因工程抗体和催化抗体。抗体之所以会人源化,是因为异源抗体在临床应用中会产生人抗鼠抗体应激反应（Human anti-mouse antibody reaction,HAMA）,对人体造成非必要的免疫损伤,给抗体的应用带来了很大局限性。因此快速便捷、具有良好特异性的人源抗体的生产对抗体应用具有十分重要的意义。本研究旨在通过CD10+干细胞与抗原共培养诱导其分化成浆细胞的方法,获取人源抗体可变区基因片段。本研究主要通过对人间充质干细胞（Mesenchymal stem cells,MSCs）的培养、鉴定、探索,从MSCs群中分选CD10+干细胞,并进行流式细胞术、短串联重复序列（Short tandem repeat,STR）、染色质核型分析,形成CD10+干细胞系,建成CD10+干细胞工作库。同时,培养、制备、纯化水疱性口炎病毒（Vesicular Stomatitis Virus,VSV）作为指示病毒,对病毒分型进行鉴定,形成一定滴度的工作指示病毒库。利用CD10+干细胞与指示病毒的共培养、分化后,分析细胞上清中Ig M/Ig G的含量,提取细胞m RNA反转录成c DNA,采用单链抗体（Sc Fv）噬菌体抗体库重链可变区（High chain variable region,VH）、轻链可变区（Light chain variable region,VL）引物扩增并获得批量的抗体Ig G的VH、VL基因,为进一步制备抗体库奠定了基础。MSCs经培养后,细胞呈现长梭状贴壁极性生长,轻度螺旋流水状排列,流式结果为CD29、CD44、CD73、CD105、CD166均为为阳性,CD11B、CD14、CD34、CD45、HLA-DR均为阴性,符合人间充质干细胞的鉴定标准,同时对MSCs也进行了成骨、成软骨、成脂肪细胞的分化鉴定。经CD10磁珠分选后的CD10+干细胞的流式阳性率为88.6%（±5）,STR分析结果与各大数据库比对均无相关信息,同时染色质核型分析也未发现传代异常,形成一定容量的CD10+干细胞工作库。指示病毒VSV通过凝胶过滤层析后,明显除去病毒上清中大部分杂质,获得了满足后期实验要求需要纯度的病毒颗粒,全病毒的N蛋白相对分子质量约为57 k Da,WB、ELISA及电镜鉴定等实验证实了纯化产物为VSV病毒,Reed-Muench法计算病毒的半数组织细胞感染量(TCID50)为10-2.72/0.1 m L,以RT-PCR的方法鉴定毒株为印第安纳毒株。将人CD10+干细胞与指示病毒VSV共培养16 d后,间接免疫荧光显示细胞CD38、CD138阳性,CD20为阴性,符合人浆细胞的表面标志物特点;结合浆细胞形态学基本特征,确定成功将CD10+干细胞分化成浆细胞。通过对共培养细胞的1～16 d培养上清中Ig M/Ig G检测,发现1～5 d培养上清中可以检测到人Ig M,Ig M最高浓度可达73.65 ng/m L;10～16 d可以检测到人Ig G,提取分化16 d细胞m RNA反转录成c DNA,采用成熟抗体Ig G-VH、VL引物扩增目的条带:分别获得了370/340 bp的VH链、320 bp的VL-λ链、320 bp的VL-κ链。本研究通过指示病毒VSV与人CD10+干细胞共培养,成功获得人源抗体VH、VL基因,为抗体基因的获取开辟了一条新途径,搭建了人源抗体基因获取的平台,也对进一步研究全人源抗体的生成机制和生物学特性有重大意义。相信随着本研究条件的优化,本抗体平台操作将更加简便,且抗体生成率得到提升,为新发病原体的防治提供高时效的新方法。