OGP-RGD多肽的基因重组及抗肿瘤活性研究

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成骨生长肽(Osteogenie Growth peptide,OGP)是一个存在于血清中的内源性14肽。最早于上世纪90年代初由损伤后再生骨髓的培养基介质中分离纯化而来,十余年来对它的生化学和生理学特性进行了多方面的研究[14]。目前OGP在促进成骨和促进造血方面的研究,已接近临床实用阶段。RGD序列是广泛分布的细胞识别系统的基本单元,作为整合素和其配体相互识别的位点,介导细胞与细胞外基质以及细胞之间的相互作用,与许多生理、病理过程如肿瘤的发生、发展、浸润及转移等密切相关[12]。本文将成骨生长肽ALKRQGRTLYGFGG改为AWKRGDRG DYGFGG序列,人工合成OGP-RGD多肽对应核苷酸序列,连接到质粒pTYB2中,再转化至大肠杆菌BL21(DE3)中表达,几丁质亲和层析树脂一步纯化OGP-RGD多肽,葡聚糖G-10除去DTT,应用MTT、细胞生长曲线实验方法研究OGP-RGD多肽的抗肿瘤活性。结果显示OGP-RGD多肽具有抗肿瘤活性。OGP-RGD多肽对HepG-2肝癌细胞的增殖具有抑制作用,OGP对王HepG-2肝癌细胞的抑制作用则不明显;OGP-RGD多肽和OGP在浓度为10-11M时对NIH3T3成纤维细胞的生长有促进作用,高浓度时对细胞生长有抑制作用。
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