银纳米簇荧光探针成像法应用于聚丙烯酰胺凝胶电泳检测人血清蛋白质

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本文建立了以DNA保护的银纳米簇为荧光探针应用于检测聚丙烯酰胺凝胶电泳分离人血清蛋白质的新方法。该方法是是建立在银纳米簇可以作为荧光探针并且可以和蛋白质相结合的基础上,开辟了银纳米簇荧光探针法直接检测人血清蛋白质的新途径。将此应用到单向、双向聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的血清蛋白,与传统的考马斯亮蓝R250(CBB-R250)染色法和银染法相比较,发现此方法具有较高的灵敏度和较好的分辨率。而且检测到了血清中的低丰度蛋白如锌-α2-糖蛋白(ZAG),此外还检测到了传统染色法无法检测到的蛋白质如α-1-抗糜蛋白酶亚型1(ACT)。实验中优化了实验条件如银纳米簇溶液的pH值、酸的种类以及泡胶时间。本文还讨论了银纳米簇与蛋白质相互作用的机理。作为一种新的荧光探针,此方法操作简单、快速、无毒且不需要价格昂贵的抗体,是对贵金属纳米簇应用领域的拓展,也是对传统蛋白检测技术的革新,在蛋白质组学研究和生物分析方面具有很大的应用潜力。
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