小肽铬对大鼠蛋白质代谢的影响与机理研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sss03157017633
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本文分别以SD大鼠和L6骨骼肌细胞为研究对象,通过活体和体外两部分试验,研究了自行制备的小肽铬对大鼠生长性能和蛋白质代谢的影响与作用机理。   体内试验,以吡啶羧酸铬为试验对照,研究了不同水平小肽铬对大鼠生长性能和蛋白质代谢的影响。选用72只健康的清洁级SD大鼠(雌雄各半),按体重一致的原则分6个处理,每个处理6个重复,每个重复2只大鼠;分别在6个处理的基础日粮中添加0、100、200、500、1000μg/kg铬(小肽铬源)和200μg/kg铬(吡啶羧酸铬源)。饲养期间,大鼠自由采食,饮用双重蒸馏水,试验期35d。试验结果表明:   饲粮小肽铬提高大鼠饲料转化效率(FE)的作用明显优于促生长作用。小肽铬提高大鼠生产性能的适宜剂量大于吡啶羧酸铬。500μg/kg的小肽铬显著提高ADG和FE(P<0.05),分别可达到17.5%和23.3%。500μg/kg小肽铬,显著降低胰岛素水平和血清BUN(P<0.05),显著提高血清球蛋白(GLO)、碱性磷酸酶(ALP)、总蛋白(TP)(P<0.05)。200μg/kg的吡啶羧酸铬对血液生化指标无显著影响。   饲粮小肽铬显著促进骨骼肌蛋白质代谢。500μg/kg的小肽铬显著提高骨骼肌总氨基酸(TAA)和TP含量,显著提高谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性(P<0.05)。   体外试验,以L6骨骼肌细胞为研究对象,分别在模拟生理胰岛素水平和不含胰岛素的培养条件下,考察了小肽铬对蛋白质代谢的影响与作用机理,各分空白对照组、三氯化铬组、吡啶羧酸铬组、小肽铬组4个处理,每个处理4个重复;以不添加任何铬源为空白对照,以三氯化铬和吡啶羧酸铬处理为试验对照,测定蛋白质分解代谢和合成代谢过程的中间产物、起关键调控作用的酶活性,及蛋白质代谢调控相关蛋白mRNA表达的量。试验结果表明:   在近似生理胰岛素水平条件下,小肽铬显著提高骨骼肌细胞总氨基酸(TAA)含量(P<0.05),显著提高γ-谷氨酰转肽酶(γGT)、5-核苷酸酶(5-NT)、谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)活性(P<0.05)。   在不含胰岛素条件下,小肽铬显著提高TP含量和5-NT和GPT活性,显著降低BUN(P<0.05)。   基因表达测定表明,骨骼肌细胞在近似生理胰岛素水平下培养,小肽铬显著上调胰岛素受体(IR)、胰岛素样生长因子1(IGF1)、胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)mRNA的表达(P<0.05);显著下调泛素(Ub)mRNA的表达(P<0.05).上调mRNA表达的幅度相对小于下调mRNA表达的幅度。   骨骼肌细胞在不含胰岛素的条件下培养,小肽铬显著上调IR和IGF1RmRNA的表达(P<0.05);显著下调UbmRNA的表达(P<0.05);不影响IGF1mRNA的表达。对上调IR基因mRNA表达的影响大于近似生理胰岛素条件下的影响;小肽铬下调泛素(Ub)基因表达的影响则相反。   两部分试验的结果表明:   ①饲料小肽铬促进生长,显著提高饲料利用效率,其作用效果优于吡啶羧酸铬;   ②小肽铬明显具有促进骼肌细胞摄取氨基酸,提高蛋白质代谢过程中关键酶活性和增加体蛋白质沉积的作用:   ③饲料小肽铬促进胰岛素受体基因表达提高蛋白质合成的作用小于抑制泛素基因的表达促进蛋白质降解的作用;   ④小肽铬对体蛋白质代谢的影响,具有显著促进合成、显著抑制降解,从而增强蛋白质沉积的作用。
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