长根菇生活史研究

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长根菇(Oudemansiella radicata),是一种食药用担子菌。目前,对该菌的生物学特性及药用价值进行了研究,但有关其生活史的报道尚未报道。本文首次对长根菇的生活史进行了较为全面的研究,主要内容及结果如下:1.长根菇的人工栽培优化长根菇的栽培条件,观察各个阶段的生长情况,收集孢子进行萌发实验。结果表明:菌丝初期白色,成熟后产生灰褐色膜状物;成熟的菌丝体可扭结产生原基,原基进一步发育成为菌蕾;菌蕾进一步发育为子实体。子实体上着生有担孢子,担孢子可以萌发,发育为菌丝体。2.长根菇不同发育时期的形态解剖学特点取不同发育时期的长根菇,制作临时装片,用刚果红溶液染色,结果表明:a.长根菇能产生两种不同的子实体,一种具有双孢担子而另一种具有四孢担子,两种子实体在宏观形态上没有区别;b.双孢长根菇菌丝无锁状联合,四孢菌株有锁状联合;c.双孢长根菇担子顶端有两个小梗,而四孢长根菇担子顶端有四个小梗,每个小梗上着生一个担孢子。d.担孢子卵圆形,13-18×10-15μm;e.菌丝有隔膜。扫描电镜观察结果表明:担子表面密布着担孢子,担孢子卵圆形,表面光滑。四孢长根菇担子细胞可见4个担子小梗。用双苯并咪唑(Hoechst33258)染色法分别对双胞长根菇和四孢长根菇的菌丝、子实体、担孢子进行荧光染色观察,结果表明:双孢长根菌丝细胞多为单核,无锁状联合;原担子中单核进行一次分裂形成两个横向或纵向排列的子核,这2个子核分别进入2个担孢子中,留下无核的空担子;成熟担孢子具有一个核。四孢长根菇菌丝细胞大多数为双核,具有锁状联合;进入原担子中的两个单倍性细胞核先发生核配,形成一个二倍性的核,再经过减数分裂形成四个染色体减半的单倍性子核,四个子核分别进入4个担孢子中,留下无核的空担子;成熟担孢子也具有一个核。3. SNPs分子标记在长根菇生活史研究中的应用在构建长根菇基因组文库的基础上分析得到了320个SNPs位点。根据这止匕SNPs位点设计了12对引物。用这些引物对不同产地、不同发育时期的四孢长根菇和双孢长根菇样品进行PCR扩增并测序。分析基因序列和图谱,表明四孢长根菇是异核体,而双孢长根菇是同核体。综上所述,推测了长根菇的生活史为:单个担孢子萌发为初生菌丝。不同极性的菌丝发生交配,形成次生菌丝。次生菌丝经过生长和成熟,产生四孢子实体。四孢子实体的担子内进行减数分裂,产生四个担孢子。若初生菌丝未发生交配,可产生双孢子实体,双孢子实体的担子内进行有丝分裂,产生两个担孢子。
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