禽白血病是由反转录病毒科,甲型反转录病毒属的病毒引起的禽类多种肿瘤性疾病的统称。自发现以来,在各国鸡群中广泛流行,临床上通常引起淋巴细胞性白血病、成髓细胞性白血病、髓细胞性白血病等,并带来免疫抑制,是危害养禽业的主要疾病之一。J亚群禽白血病在临床上的危害相对较大,然而目前对于J亚群禽白血病病毒（ALV-J）的研究都集中在流行病学、致病性和病毒的分子结构与功能等方面,对于病毒与宿主免疫应答方面的相关研究很少。特别是在机体是怎样对ALV-J产生抗病毒应答反应的了解知之甚少。并且以往有关病毒的研究主要集中在较为单一的细胞系上,而PBMC作为外周血液循环中成熟的淋巴细胞群,具有包括T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞、单核巨噬细胞在内的多种免疫细胞。这对于研究禽白血病病毒（ALV）、传染性法氏囊病病毒（IBDV）、马立克氏病病毒（MDV）等对禽类养殖业危害巨大的免疫抑制病毒提供了一个可供参考的研究工具。为了研究ALV-J记忆性PBMC是如何对J亚群禽白血病病毒产生抗病毒的细胞免疫应答变化,本研究试图通过体外试验的方式探究ALV-J引起的免疫应答变化。本试验通过建立体外J亚群禽白血病病毒（SCAU-HN06株）感染记忆性PBMC模型进行后续宿主免疫应答及相互作用的研究。模型结合活细胞总数的变化和PBMC感染情况,采用在病毒感染记忆性PBMC后引起的相对病毒拷贝数最高和S/P值最高的病毒滴度(即104.5TCID50)作为后续进行体外感染试验的病毒滴度,并且采用4 HPI（Hour post-infection,HPI）和8 HPI作为免疫细胞表型研究和免疫相关基因研究的检测时间点。为了直观地了解J亚群禽白血病病毒体外感染记忆性PBMC的免疫应答变化情况,本试验在4 HPI和8 HPI时利用不同通道的表面荧光单克隆抗体与PBMC共同孵育并借助流式细胞术检测抗体标记后的PBMC样本。结果显示,感染组与对照组相比,在4 HPI时,CD8+T淋巴细胞百分比显著降低（P＜0.05）;在8 HPI时,KUL01和MHCⅡ都被标记的双阳性细胞百分比显著增多（P＜0.05）。为了了解ALV-J引起记忆性PBMC的免疫相关基因的转录水平的变化情况,借助q RT-PCR检测并分析了十种免疫相关基因。结果显示,在感染4 HPI时,IL-13（P＜0.01）、IL-4（P＜0.01）、IL-5基因（P＜0.05）的转录水平上调。在感染8 HPI时,IFN-γ、IL-13、IL-4、IL-5和Mx1基因的转录水平上调（P＜0.01）,CXCLi1基因的转录水平下调（P＜0.01）。综上所述,本试验首次筛选出ALV-J（SCAU-HN06株）体外感染原代ALV-记忆性PBMC的试验模型:在无其他外源性刺激的条件下ALV-J感染后S/P≥0.2且活细胞数不低于80%的情况下的时间在8 h以内。并且证实了ALV-J在体外感染原代记忆性PBMC阶段诱导了免疫相关基因的表达,引起了T淋巴细胞和抗原递呈细胞的百分比变化。本研究对于探讨ALV等相关禽类病毒与宿主免疫系统互作提供了一个潜在的研究素材和感染模型,并且有助于深入探索ALV-J的致病机制,为禽白血病的防控提供理论依据。