酶催化金属纳米颗粒生长及其应用研究

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免疫传感器结合免疫反应的高特异性和传感技术的高灵敏度,是一种新型的生物传感器,具有耗时短,灵敏度高和检测限低等优点,具有广泛的应用前景。而将纳米技术引入免疫传感器领域,有望提高免疫传感器的检测性能。贵金属纳米颗粒显著的光学,物理和化学性质,如荧光特性,导电性,表面等离子共振,氧化还原性质和表面功能化特性,目前被广泛运用于新型免疫传感器的研制。金属纳米颗粒可与有机物或生物分子连接用于选择性检测小分子,高分子化合物。金属纳米颗粒在免疫传感器的运用很大程度上依赖于颗粒尺寸的大小,形状和均一程度。因此制备出颗粒均一、稳定性好的金属纳米颗粒也是目前的研究热点。本论文共分为四章。第一章为绪论部分,主要介绍以下内容:1)AuNPs,AgNPs及Au@AgNPs(core-shell)的合成方法;2)酶致纳米金生长及其应用;3)免疫传感器;4)本课题的研究目的和主要内容。第二章开发了一种简单,快速,经济的合成尺寸均一,稳定性较好的AuNPs,AgNPs和Au@AgNPs(core-shell)的方法。这个方法主要是利用生物酶在一定条件下催化底物产生的具有还原性的物质可以还原溶液中的HAuCl4溶液和银氨溶液,产生单质Au和Ag,裹在晶种表面使纳米颗粒长大。改变HAuC14溶液和银氨溶液的浓度,可以合成出不同尺寸,粒径均一分布的AuNPs,AgNPs和Au@AgNPs(core-shell)。第三章是基于第二章的合成原理,抗体上负载的葡萄糖氧化酶在一定条件下可以催化溶液中的葡萄糖产生还原剂过氧化氢,还原HAuCl4产生Au,使玻片上的AuNPs颗粒变大,从而使AuNPs的吸光度增强,根据吸光度的变化与待测抗原浓度成比例来检测样品中神经性特异性烯醇化酶的浓度。这种方法不仅灵敏度高,选择性和重现性好,而且仪器简单,其检测限低至1×10-18g/mL。第四章不同于第三章的芯片传感器,利用相同的原理在水相中稳定存在的纳米金表面装载上葡萄糖氧化酶,再结合磁珠的分离技术,从而实现在溶液中对肝癌肿瘤标记物甲胎蛋白(AFP)的高灵敏检测。结果表明,基于这种方法的抗原检测,不仅灵敏度高,选择性好,重现性高,而且操作简单,无需复杂的仪器设备。利用本方法可以达到的检测限低至1×10-12 g/mL。
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