【摘 要】
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该实验用RT-PCR方法从经PHA刺激的人外周血单个核细胞中获取人成熟白细胞介素18cDNA(hIL-18cDNA),将其克隆至天然蛋白表达载体PBV220中,并进一步亚克隆至融合蛋白表达载体PGE
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该实验用RT-PCR方法从经PHA刺激的人外周血单个核细胞中获取人成熟白细胞介素18cDNA(hIL-18cDNA),将其克隆至天然蛋白表达载体PBV220中,并进一步亚克隆至融合蛋白表达载体PGEX-4T-3中.酶切鉴定表明一约470bp的基因片段克隆及亚克隆至PBV220及PGEX-4T-3中,PCR可分别从两种重组体中扩增出大小相同的分子片段,序列测定表明克隆及亚克隆至两种载体中的基因序列与已报道的成熟hIL-18cDNA的序列完全一致.将PBV220-hIL-18及GPEX-hIL-18在E.coliDH5α及E.coliTG1中进行表达,SDS-PAGE初步分析表明PBV220-hIL-18在E.coliDH5α及E.coliTG1中均获得了表达,PGEX-hIL-18在E.coliDH5α中获得了表达.该实验为进一步获取有生物学活性的hIL-18及制备hIL-18 单体克隆抗除抗体打下了基础.
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