实验1兔胫骨慢性骨髓炎模型建立的研究目的:探讨兔胫骨骨髓炎模型制作方法。方法:成年新西兰大白兔10只,给予右胫骨内侧中上段开0.3×1cm矩形骨窗,向骨窗内注入0.5ml,5%鱼肝油酸钠溶液,等待15分钟后,再沿髓腔方向按0.2ml/kg注入5×106CFU/ml金黄色葡萄球菌悬液,无菌骨蜡封闭窗口。术后不使用任何抗生素,常规回笼饲养。实验期间观察实验兔一般情况,测量体重、肛温,3周后通过患肢X线检查及局部产物细菌学培养,判定兔胫骨慢性骨髓炎模型是否成功建立。结果:1只实验兔于术后第4天死亡,鼻部有黄色分泌物,腹泻。解剖死亡兔,未见心脏、肺脏等器官异常改变,考虑患肢感染后,患兔不耐受,导致全身感染死亡。其余实验兔精神状态较差,饮食、饮水量减少,活动量降低,体重呈下降趋势。所有实验兔术后体温升高,并于第4天升至最高值(40.5℃-41.2℃),随后体温逐渐恢复至正常(39.2℃-39.6℃)。术后第4天,实验兔患肢术区软组织肿胀明显,局部皮肤破溃伴有黄白色脓性分泌物溢出,后逐渐有窦道形成,皮肤呈暗红色,周围毛发生长稀疏。患肢拒绝触碰,肿胀处触之有波动感,局部皮温升高。术后第21天对右下肢行X线检查显示,右胫骨中段软组织肿胀影,骨膜反应明显、内侧骨皮质密度降低并可见溶骨性病灶出现。局部产物行细菌学培养,结果显示为金黄色葡萄球菌。结论:胫骨内侧开窗并注入合适浓度的金黄色葡萄球菌悬液,同时配合5%鱼肝油酸钠和无菌骨蜡可以成功、有效的制备出兔胫骨骨髓炎模型。实验2“疽愈喷剂”治疗慢性骨髓炎的疗效研究目的:观察疽愈喷剂治疗兔胫骨慢性骨髓炎模型的疗效,并初步探讨其作用机制。方法:将48只新西兰大白兔采用随机数字表法分为6组(正常组、模型组、西药组、疽愈喷剂高、中、低剂量组)。正常组正常饲养,不做任何干预;其余5组制备兔胫骨慢性骨髓炎模型,经X线检测后证实40只模型兔制备成功。疽愈喷剂中剂量组按高剂量组进行0.5倍稀释,疽愈喷剂低剂量组按中剂量组进行0.5倍稀释,其高、中、低剂量组浓度分别为3.77g/ml、1.89g/ml,0.95g/ml,其外洗剂量为10ml,每日2次,1min灌洗完毕。西药组以庆大霉素稀释液(1600U/ml)10ml外洗,模型组以生理盐水10ml外洗,两组干预方法同疽愈喷剂各组。整个治疗周期为21天。分别于第7、14、21天给予各组实验兔耳缘静脉抽血,观察白细胞计数、血沉、C-反应蛋白、血清溶菌酶含量变化。分别于第7、14、21天测量病灶区软组织肿胀程度,观察实验兔跛行步态变化及X线改变情况。治疗21天后,处死各组实验兔,取病变区骨组织行病理学检查。结果:疽愈喷剂和庆大霉素均可缓解实验兔病灶区软组织肿胀程度。在治疗21天后,各治疗组与模型组比较均有显著差异(P<0.01);疽愈喷剂各组与西药组相比较,疽愈喷剂低剂量组肿胀有所缓解,差异有统计学意义(P<0.05);疽愈喷剂高、中剂量组肿胀消退程度明显,具有显著统计学意义(P<0.01)。疽愈喷剂可以改善实验兔患肢跛行情况。与模型组比较,治疗21天后,疽愈喷剂高剂量组和中剂量组步态评分进一步降低,差异具有显著统计学意义(P<0.01)。治疗21天后,疽愈喷剂高剂量组与西药组比较步态评分降低,差异有统计学意义(P<0.05);但疽愈喷剂中、低剂量组与西药组之间无明显统计学意义(P>0.05)。疽愈喷剂具有较好的抗感染、抗炎作用,同时能够有效改善机体免疫功能。治疗21天后,与模型组比较,疽愈喷剂各组与西药组白细胞计数均有不同程度的升高(P<0.01);与西药组比较,疽愈喷剂高剂量组白细胞计数升高明显,具有显著统计学意义(P<0.01);中剂量组无统计学意义(P>0.05);虽然疽愈喷剂低剂量组白细胞有所升高,但明显低于西药组(P<0.05)。与模型组比较,西药组在各治疗时间段血清溶菌酶未见明显变化,两者比较无统计学意义(P>0.05);疽愈喷剂各组在各治疗时间段血清溶菌酶含量均较高,有显著统计学意义(P<0.01)。与西药组比较,疽愈喷剂各组在治疗第7天及21天后,血清溶菌酶含量均较高,有显著统计学意义(P<0.01);治疗21天后,高剂量组在疽愈喷剂各组中升高最明显(P<0.01),中、低剂量组也有不同程度的升高,具有统计学意义(P<0.05)。疽愈喷剂和庆大霉素都能够有效控制炎症,减缓疾病发生的进程。与模型组相比较,疽愈喷剂各组和西药组血沉、C-反应蛋白均降低,差异显著(P<0.01)。与西药组比较,治疗21天后,疽愈喷剂高剂量组血沉降低最为明显,具有统计学意义(P<0.05);中剂量组无统计学意义(P>0.05);低剂量组血沉降低不如西药组,两者具有统计学意义(P<0.05)。疽愈喷剂高剂量组C-反应蛋白在各治疗组中下降最明显,具有显著统计学意义(P<0.01),中剂量组无统计学意义(P>0.05),低剂量组C-反应蛋白降低较慢,具有统计学意义(P<0.05)。疽愈喷剂能够有效改善病变骨组织,对病灶区骨组织起到一定的修复作用。治疗21天后,模型组X线主要以重度为主,主要表现为骨膜反应明显,骨质明显破坏,有片状透亮区,可见死骨形成;西药组以中重度为主,表现为骨质明显破坏、外形膨隆变粗不整齐,髓腔狭窄甚至消失,无明显死骨生成;疽愈喷剂中、低剂量组以中度为主,表现为病骨增生明显,外形不规则,骨质密度增高,髓腔狭窄。疽愈喷剂高剂量组以轻度为主,表现为病变区骨质密度较正常骨质仍高,与正常骨质具有明显界线,髓腔逐步再通,骨纹理逐渐明显。结论:疽愈喷剂可以改善慢性骨髓炎模型兔WBC、ESR、CRP等炎症指标,起到很好的抗菌、抗炎的作用,同时疽愈喷剂还能在一定程度上促进病变区骨与软组织的修复,改善实验兔跛行状态,其机制除了与药物具有抗炎、抗菌作用外,还可能与其能改善实验兔机体免疫功能有关。