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目的:
过氧化物酶体增殖剂激活受体β/δ(PPARβ/δ)是参与人体多种代谢过程的基因调控转录因子。当其与配体结合而激活后,可与目的基因的启动子反应元件相结合来调控基因的转录过程。目前已有诸多研究表明PPARβ/δ可加快脂肪酸代谢,增强胰岛素敏感性,抑制炎症反应及增加肌纤维的氧化以提高运动表现等。然而,对于癌症,PPARβ/δ起到促进或是抑制作用,仍存在争议,特别在原发性肝癌方面的研究明显缺乏。课题组前期研究提示PPARβ/δ对肝癌起抑制作用,然而这些都是体外实验结果,该作用是否会受体内环境及各组分影响发挥相应作用并不清楚,故我们用PPARβ/δ基因转染的人肝癌细胞及野生型人肝癌细胞移植瘤裸鼠模型,通过检测两组人肝癌移植瘤模型中肿瘤相关蛋白,探讨过氧化物酶体增殖物激活受体β/δ在人肝癌发生中的具体作用,并探讨其可能的机制。
方法:
将野生型HepG2人肝癌细胞株和PPARβ/δ基因转染HepG2人肝癌细胞株接种在BALB/c(nu/nu)小鼠右上肢外侧,构建人肝癌移植瘤裸鼠模型,即对照组和实验组,两组均给予正常饲料饲养,约到4周后,颈椎脱臼法处死所有实验小鼠,剥离移植瘤组织,并留取组织标本。用石蜡切片免疫组化SP法检技术检测两组肿瘤组织中p-Akt、p-mTOR、caspase3、vimentin、E-cadherin、Ki-67的表达。
结果:
PPARβ/δ基因转染人肝癌细胞组及野生型人肝癌细胞组均能成瘤,各组裸鼠移植瘤体积生长均较缓慢。在给药的第28天,野生型人肝癌移植瘤移植瘤体积小于实验组,但在其它各时点各组之间差异无统计学意义。在PPARβ/δ表达的实验组,p-Akt、mTOR、Vimentin、Ki-67的表达明显低于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),而E-cadherin表达明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);caspase3在实验组及正常对照组均有表达,其差异无统计学意义(P>0.05)。
结论:
在人肝癌移植瘤裸鼠模型中,PPARβ/δ的表达对HepG2人肝癌细胞移植瘤存在潜在抑制作用。可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR通路的激活诱导的细胞凋亡,抑制细胞存活,同时通过抑制及上皮细胞-间充质转化(EMT)起到抑制肝癌细胞迁移和增殖的作用,从而抑制肿瘤的发生发展。
过氧化物酶体增殖剂激活受体β/δ(PPARβ/δ)是参与人体多种代谢过程的基因调控转录因子。当其与配体结合而激活后,可与目的基因的启动子反应元件相结合来调控基因的转录过程。目前已有诸多研究表明PPARβ/δ可加快脂肪酸代谢,增强胰岛素敏感性,抑制炎症反应及增加肌纤维的氧化以提高运动表现等。然而,对于癌症,PPARβ/δ起到促进或是抑制作用,仍存在争议,特别在原发性肝癌方面的研究明显缺乏。课题组前期研究提示PPARβ/δ对肝癌起抑制作用,然而这些都是体外实验结果,该作用是否会受体内环境及各组分影响发挥相应作用并不清楚,故我们用PPARβ/δ基因转染的人肝癌细胞及野生型人肝癌细胞移植瘤裸鼠模型,通过检测两组人肝癌移植瘤模型中肿瘤相关蛋白,探讨过氧化物酶体增殖物激活受体β/δ在人肝癌发生中的具体作用,并探讨其可能的机制。
方法:
将野生型HepG2人肝癌细胞株和PPARβ/δ基因转染HepG2人肝癌细胞株接种在BALB/c(nu/nu)小鼠右上肢外侧,构建人肝癌移植瘤裸鼠模型,即对照组和实验组,两组均给予正常饲料饲养,约到4周后,颈椎脱臼法处死所有实验小鼠,剥离移植瘤组织,并留取组织标本。用石蜡切片免疫组化SP法检技术检测两组肿瘤组织中p-Akt、p-mTOR、caspase3、vimentin、E-cadherin、Ki-67的表达。
结果:
PPARβ/δ基因转染人肝癌细胞组及野生型人肝癌细胞组均能成瘤,各组裸鼠移植瘤体积生长均较缓慢。在给药的第28天,野生型人肝癌移植瘤移植瘤体积小于实验组,但在其它各时点各组之间差异无统计学意义。在PPARβ/δ表达的实验组,p-Akt、mTOR、Vimentin、Ki-67的表达明显低于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),而E-cadherin表达明显高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);caspase3在实验组及正常对照组均有表达,其差异无统计学意义(P>0.05)。
结论:
在人肝癌移植瘤裸鼠模型中,PPARβ/δ的表达对HepG2人肝癌细胞移植瘤存在潜在抑制作用。可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR通路的激活诱导的细胞凋亡,抑制细胞存活,同时通过抑制及上皮细胞-间充质转化(EMT)起到抑制肝癌细胞迁移和增殖的作用,从而抑制肿瘤的发生发展。