【摘 要】
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研究背景:变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)是机体接触过敏原后所致的由Ig E介导、鼻黏膜嗜酸性粒细胞(eosinophils,EOS)浸润并伴Th2细胞因子分泌增加的Ⅰ型变态反应性疾病,以鼻痒、鼻塞、流涕、打喷嚏为主要症状。AR是全球最常见的变应性疾病之一,近几十年来发病率(10%~40%)呈上升趋势,严重影响患者生活质量。“卫生假说”显示蠕虫感染可通过复杂机制对宿主进行免疫
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研究背景:变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)是机体接触过敏原后所致的由Ig E介导、鼻黏膜嗜酸性粒细胞(eosinophils,EOS)浸润并伴Th2细胞因子分泌增加的Ⅰ型变态反应性疾病,以鼻痒、鼻塞、流涕、打喷嚏为主要症状。AR是全球最常见的变应性疾病之一,近几十年来发病率(10%~40%)呈上升趋势,严重影响患者生活质量。“卫生假说”显示蠕虫感染可通过复杂机制对宿主进行免疫调节。研究表明,蠕虫感染可抑制过敏性疾病发生发展,二者呈负相关。由于蠕虫感染可引起机体寄生虫病及相关病理性损伤,故采用蠕虫感染治疗相关疾病在临床上受到限制。细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)寄生于动物或人体肝、肺、脑等组织器官,在各种自身免疫性和过敏性疾病动物模型中,细粒棘球蚴感染及其衍生蛋白均可改善过敏性疾病炎症反应,提示其可诱导宿主免疫系统产生较强的免疫抑制效应。AR是以Th2细胞免疫反应为主的变态反应性疾病,目前采用蠕虫及其衍生物进行干预的相关研究较少。本研究探索了细粒棘球蚴囊液蛋白(hydatid cyst fluid protein,HCFP)调节AR小鼠炎症反应的效果,并分析了其免疫学机制,从而为后续采用该蛋白治疗免疫失调性疾病提供依据。目的:观察细粒棘球蚴囊液蛋白对卵清蛋白诱导的小鼠变应性鼻炎的效果。方法:将24只BALB/c小鼠(8~10周龄,体质量约20 g)随机分成A(空白对照组)、B(空白干预组)、C(AR模型组)、D(AR+HCFP干预组)4组,每组6只。在基础致敏阶段(实验第0、2、4、6、8、10、12天),A、B、C、D组小鼠分别腹腔注射体积为200μL的无菌PBS,含20μg HCFP的无菌PBS溶液,含50μg OVA和5 mg Al(OH)3凝胶的无菌PBS溶液,含50μg OVA、5 mg Al(OH)3凝胶和20μg HCFP的无菌PBS溶液。在局部激发阶段(实验第14~20天),A、B、C、D组小鼠分别鼻腔滴注体积为40μL的无菌PBS、含20μg HCFP的无菌PBS、含2 mg OVA的无菌PBS、含2 mg OVA和20μL HCFP的无菌PBS。观察各组小鼠行为学改变并进行行为学评分,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠血清IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-10、TGF-β和OVA-s Ig E水平,采用HE染色观察各组小鼠鼻黏膜病理学改变。结果:C组小鼠行为学评分[(6.83±0.50)分]显著高于A组[(1.17±0.52)分]和B组[(1.33±0.52)分],D组行为学评分[(3.50±0.50)分]较C组降低(P均<0.05)。4组小鼠血清中IFN-γ(F=4.08,P<0.05)、IL-4(F=275.90,P<0.05)、IL-5(F=96.82,P<0.05)、IL-10(F=77.67,P<0.05)、TGF-β(F=9.98,P<0.05)及OVA-s Ig E(F=44.69,P<0.05)水平差异均有统计学意义。C组小鼠血清中IFN-γ水平低于A、B组和C组,且血清中IL-4、IL-5、OVA-s Ig E水平均高于A、B组和C组(P均<0.05)。HCFP干预后,D组小鼠血清中IL-10、TGF-β水平高于C组(P均<0.05)。镜下观察示,C组小鼠鼻黏膜纤毛脱落缺损明显,杯状细胞数量增多且体积增大,间质水肿,黏膜下见小血管扩张;D组小鼠鼻黏膜病变较C组轻。结论:1.细粒棘球蚴囊液蛋白减轻了OVA诱导的小鼠鼻黏膜损伤;2.细粒棘球蚴囊液蛋白可刺激调节性细胞因子,纠正Th1/Th2失衡,对AR模型小鼠发挥抗过敏的作用,表明其可应用于临床上AR的治疗。
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