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即时检测技术(Point-of-care Testing, POCT)是指在病患身旁进行的一种现场快速检测分析技术,具有便携、操作简单、分析快速等特点,在临床检测中应用广泛。转氨酶是存在于人体肝脏、心脏等器官中的一种重要的代谢酶,其常作为器官受损的标记物。而现有的针对转氨酶的临床检测技术需要专业的技术操作人员、特定的实验室和大型的仪器设备,不利于即时、快速的诊断,尤其对战场伤员、行动不便患者等。针对以上问题,本文结合3D打印电化学传感技术、纳米效应增强技术、微流控技术、电动纳流体富集技术,为实现以POCT的方式进行转氨酶高灵敏度的检测,进行了一系列的研究探讨,主要内容如下:首次通过生物体内的联合脱氨基作用建立了转氨酶电化学检测体系,将还原型辅酶Ⅰ(NADH)与转氨酶的电化学检测结合起来,摆脱了以往转氨酶电化学检测体系中依赖氧气的局面,同时由于体系中具有绝对专一性的谷氨酸脱氢酶(GLDH)的参与,使得该体系在转氨酶检测中具有其他体系所没有的特异性。运用购买的丝网印刷碳电极(SPCE),通过循环伏安法对该反应体系进行了验证,得到了不同酶浓度对应的电流响应,在60U/L到300U/L的检测范围内两者具有较好的线性关系(R2=0.97219),检测灵敏度为0.08171 μA-cm-2·U-1·L。比较了碳纳米管(CNT)修饰SPCE和未修饰SPCE电化学检测转氨酶的性能,结果表明,修饰有CNT的电极具有更好的电流响应性能(最大提高了14.19%)。为了改善电化学传感器的性能,提高该体系在转氨酶检测方面的灵敏度,基于3D打印技术设计并制作了电化学传感器,并完成了电极的石墨烯修饰。通过对该电化学传感器进行转氨酶检测实验,结果表明在20U/L-250U/L检测范围内酶活性与电流信号之间具有较好的线性关系(20-50U/L范围内为R2=0.90598,50-250U/L范围内R2=0.97962),灵敏度分别为0.85385和0.18809μA·cm-2·U-1·L。比较了打印碳电极与石墨烯修饰电极对NADH的电化学响应,结果表明修饰电极具有较好的电流响应(提高约20%)和较低的氧化电位(低浓度区降低约30%)。为了实现微流控与电化学检测体系的结合,制作了微流控电化学传感芯片,通过结合微流控技术进一步提高电化学传感检测转氨酶的性能。基于该芯片进行了转氨酶的电化学测试,结果表明在10-250U/L的检测范围内酶活性与电流响应信号之间具有较好的线性关系(10-50U/L范围内为R2=0.97986,50-250U/L范围内R2=0.99173),两个范围内的灵敏度分别为0.14029和0.08893μA·cm-2·U-1·L。