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第一部分精氨酸对动脉粥样硬化大鼠主动脉miRNA-221、eNOS的表达影响[目的]:(1)研究精氨酸在SD大鼠动脉粥样硬化形成中的预防及治疗作用;(2)miRNA-221、一氧化氮合酶在精氨酸干预SD大鼠动脉粥样硬化形成中的作用。[方法]:(1)将60只SD大鼠分成6组:普通组10只、高脂组10只、精氨酸预防组10只、精氨酸治疗组10只、辛伐他汀组10只、联合治疗组10只,除普通组外其余5组给予高脂饮食(精氨酸预防组加用精氨酸)12周。12周后,普通组和高脂组给予生理盐水、精氨酸预防组和精氨酸治疗组给予精氨酸注射液、辛伐他汀组给予辛伐他汀片、联合治疗组给予精氨酸注射液和辛伐他汀片灌胃12周,处死大鼠。(2)检测6组大鼠血清hs-CRP,取各组大鼠主动脉制作常规HE染色病理切片。(3)采用real-time PCR方法检测各组大鼠主动脉miRNA-221表达量,western blot检测大鼠主动脉eNOS的表达量。[结果]:(1)主动脉常规病理提示除普通组外,其余5组主动脉内膜厚度均增加,精氨酸治疗组、精氨酸预防组、辛伐他汀组、联合治疗组内膜厚度增加程度均较高脂组减轻,有统计学意义(p<0.05)。(2)hs-CRP水平在高脂饮食的5组大鼠中均增加,较普通饮食组差异有统计学意义(p<0.05)。其中,精氨酸治疗组、精氨酸预防组、辛伐他汀组、联合治疗组hs-CRP水平较高脂组降低,有统计学意义(p<0.05)。(3)miRNA-221表达在高脂饮食的5组较普通组明显升高,其中,精氨酸预防组、辛伐他汀组、联合治疗组miRNA-221表达较高脂组降低,差异有统计学意义(p<0.05); eNOS水平在高脂饮食的5组较普通组明显降低,其中,精氨酸预防组、辛伐他汀组、联合治疗组miRNA-221表达较高脂组升高,差异有统计学意义(p<0.05)。[结论]:(1)大鼠可以通过高脂饮食成功建立动脉粥样硬化模型,口服精氨酸可以减轻高脂饮食大鼠血管内皮炎症反应、减轻内膜增厚,延缓动脉粥样硬化的发生、发展。(2)精氨酸抗动脉粥样硬化机制除了提高底物浓度增加N0途径外,尚可能通过下调主动脉miRNA-221表达,进而提高主动脉eNOS水平从而发挥抗动脉粥样硬化作用,这有待于在细胞水平上得到进一步验证。第二部分原代培养大鼠主动脉内皮细胞miRNA-221对eNOS表达情况的实验研究[目的]验证大鼠主动脉内皮细胞]miRNA-221是否可以调节eNOS表达。[方法]原代培养的SD大鼠主动脉内皮细胞,分为对照组、拮抗组和阴性对照组,分别加入Lipfectamine 2000、antagormiR-221与Lipfectamine 2000混合液、miRNA-221 NC与Lipfectamine 2000混合液转染干预,real-time PCR方法检测各组内皮细胞eNOS mRNA、western blot检测各组内皮细胞eNOS的表达量。[结果]拮抗组大鼠主动脉内皮细胞eNOS mRNA及eNOS蛋白表达水平均较对照组及阴性对照组明显升高,差异有统计学意义(p<0.05);对照组及阴性对照组大鼠主动脉内皮细胞eNOS mRNA及eNOS蛋白表达水平无明显统计学差异(p<0.05)。[结论]大鼠主动脉内皮细胞miRNA-221可以调节eNOS表达。