【摘 要】
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目的:观察茯苓多糖对自由饮用葡聚糖硫酸盐（DSS）致溃疡性结肠炎（UC）小鼠模型和三硝基苯磺酸（TNBS）/乙醇灌肠致UC大鼠模型的影响,研究茯苓多糖对UC动物模型的药效特点及机制。方法:实验一:自由饮用4%DSS溶液7天制备UC小鼠模型。随机分组,灌胃给药。空白对照组与DSS组每日灌胃蒸馏水,阳性对照组灌胃柳氮磺吡啶溶液,其余组分别灌不同剂量的茯苓多糖溶液（400mg/Kg、200mg/Kg、1
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目的:观察茯苓多糖对自由饮用葡聚糖硫酸盐（DSS）致溃疡性结肠炎（UC）小鼠模型和三硝基苯磺酸（TNBS）/乙醇灌肠致UC大鼠模型的影响,研究茯苓多糖对UC动物模型的药效特点及机制。方法:实验一:自由饮用4%DSS溶液7天制备UC小鼠模型。随机分组,灌胃给药。空白对照组与DSS组每日灌胃蒸馏水,阳性对照组灌胃柳氮磺吡啶溶液,其余组分别灌不同剂量的茯苓多糖溶液（400mg/Kg、200mg/Kg、100mg/Kg,相当于灌胃原药10mg、5mg、2.5mg）,每天给药1次,连续给药7天。检测血清中炎性因子白介素-6（IL-6）、白介素-10（IL-10）、二胺氧化酶（DAO）水平;计算脾脏指数;检测结肠匀浆中细胞间黏附因子-1（ICAM-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;观察结肠组织形态的病理变化;免疫组化法检测结肠组织中Toll-4受体（TLR4）及核因子-κB（NF-κB）蛋白表达情况。实验二:5%TNBS/乙醇灌肠法制备UC大鼠模型,造模剂量为75mg/kg。空白对照组与TNBS组灌胃蒸馏水,阳性对照组灌胃柳氮磺吡啶溶液,其余组分别灌胃不同剂量的茯苓多糖溶液（400mg/Kg、200mg/Kg、100mg/Kg,相当于灌胃原药100mg、50mg、25mg）,每天给药一次,连续给药7天。检测血液中白细胞（WBC）及单核细胞（Mon%）数目;检测血清白介素-12（IL-12）、白介素-17A（IL-17A）、内皮素（ET）、干扰素-γ（IFN-γ）、DAO、D-乳酸（D-LA）水平;检测结肠匀浆中ICAM-1、白介素-1β（IL-1β）、TNF-α水平;计算胸腺指数及脾脏指数;观察脾脏、胸腺及结肠组织形态病理变化;免疫组化法检测结肠组织中白介素-1（IL-1）、IL-1β、TLR4、髓样分化因子（MyD88）、NF-κB蛋白表达情况。结果:UC小鼠模型表观可见毛色不光、体重下降、弓背、肛门稀便甚至血便;结肠长度缩短,疾病活动指数升高;血清:IL-6及DAO水平升高,IL-10水平下降;结肠组织匀浆中TNF-α和ICAM-1水平升高,脾脏肿大,病理切片可见炎症因子浸润严重,隐窝结构变扭曲。综上,UC小鼠模型体内炎症因子与细胞因子分泌异常,病理变化明显。茯苓多糖可改善UC小鼠模型表观指标,抑制体重下降,改善结肠长度缩短程度,DAI指数降低;降低脾脏指数;降低血清IL-6及DAO水平,升高血清IL-10水平,降低结肠组织匀浆TNF-α和ICAM-1水平;改善小鼠结肠炎症浸润以及结肠组织中TLR4、NF-κB蛋白表达升高的情况。实验二:UC大鼠模型表观可见毛色不光、弓背倦怠、体重下降、肛门稀便甚至血便;结肠长度缩短,DAI指数升高;胸腺指数下降、脾脏指数升高;血液中WBC、Mon%升高;血清IL-12、IL-17A、ET、IFN-γ、DAO、D-LA水平升高;结肠组织匀浆TNF-α、IL-1β、ICAM-1水平升高;病理观察可见炎症因子浸润严重,隐窝结构变扭曲;结肠组织中IL-1、IL-1β、TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达升高。提示UC大鼠模型体内炎症因子与细胞因子分泌异常,病理变化明显。茯苓多糖可改善UC大鼠模型表观指标,抑制大鼠体重下降;降低DAI指数;升高胸腺指数,降低脾脏指数;降低血液中WBC、Mon%;降低血清IL-12、IL-17A、ET、IFN-γ、DAO及D-LA水平;降低结肠组织匀浆中TNF-α、IL-1β、ICAM-1水平;改善大鼠结肠病理变化,降低结肠组织中IL-1、IL-1β、TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达。结论:茯苓多糖可增加UC大、小鼠模型的结肠长度,降低机体内炎症因子及细胞因子水平,改善结肠组织病理变化,抑制结肠组织中TLR4、MyD88、NF-κB蛋白表达。茯苓多糖是通过调节TLR4/MyD88/NF-κB通路发挥改善UC炎症浸润的作用。
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