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本文合成了三种PEG分子量的聚乙二醇化聚十六烷基氰基丙烯酸酯(PEG-PHDCA)作为表面修饰材料,选用小分子药物羟基喜树碱为模型药物,制备了隐形纳米囊泡,对其组装机理、药物与膜材的相互作用进行系统的研究和论证;系统的考察了该类囊泡的理化特性(粒径、MePEG分子量、表面电位、固有水化层厚度、PEG嵌入脂质双层的效率、PEG链的表面密度)与其体外牛物学指标(血浆蛋白吸附、补体消耗、巨噬细胞吞噬)、体内药动学、药效学和分布参数之间的关系,以闸明了该类囊泡长循环和肿瘤靶向规律。 首先,合成了PEG分予量为2000、5000、10000的PEG-PHDCA,测定了共聚物的溶血性、临界胶束浓度。建立了羟基喜树碱的HPLC分析方法,测定了羟基喜树碱(HCPT)在水和正辛醇中的表观溶解度以及正辛醇/水的表观分配系数,考察了不同pH值条件下羟基喜树碱的表观开环平衡常数,为设计处方、确定工艺条件及建立体内分析方法提供依据。 以PEG-PHDCA、司盘、胆固醇为载体材料,采用薄膜分散-水化超声法制备了HCPT囊泡,以粒径、包封率、载药量为指标,在单因素考察的基础上,通过正交设计实验,优化HCPT囊泡处方和工艺,制备了三种粒径的PEG5000-PHDCA囊泡(80nm、150nm、210nm左右)和三种PEG分予量修饰(PEG Mr2000、5000、10000)的PEG-PHDCA囊泡。制备了80nm左右的PHDCA囊泡作为对照品。为提高囊泡的稳定性,进一步优化冻干保护剂,制备了不同囊泡的冻干品。 对HCPT囊泡的理化性质进行了系统的考察。结果发现,冻干品水化后电子显微镜下囊泡呈圆形,大小比较均匀,边缘光滑。随着PEG分子量的增加,Zeta电位接近0,固有水化层(FALT)变厚,但同时PEG嵌入脂质双层的效率下降,PEG链的表面密度(δ)变小,两个相邻PEG链间的距离D变大(p<0.05)。随粒径的增大,Zeta电位的代数值略变小,FALT略变薄(p>0.05),PEG链的表面密度δ变小,两个相邻PEG链间的距离D变大(p<0.05)。80%以上的HCPT在囊泡中以内酯环形式存在。体外释放试验结果表明,PEG修饰的囊泡释药快于PHDCA囊泡,且随PEG分子量的增大和粒径的减小,释药加快;体外释药符合一级动力学、Higuchi方程和Hixon-Crowell模型,释药机理为Fickian扩散。 膜组装研究表明,span的CPP值大于0.5,可形成具有双分子层的囊泡。差示量热分析(DSC)和X射线衍射(XRD)表明,HCPT与膜材发生一定的相互作用。~1H-NMR证明HCPT与span形成氢键,表面用PEG-PHDCA修饰后,氢键作用仍然存在,氢键作用解释了HCPT熔点升高的现象。囊泡的载药是亲脂作用力和氢键作用力共同作用的结果。 纳米囊泡体外生物学评价结果表明,PEG修饰对囊泡有明显的保护作用,与PHDCA囊泡相比可显著减少血浆蛋白吸附,补体消耗和巨噬细胞吞噬;在不同粒